CAMBIOS TRANSCRIPTOMIC Y EPIGENÉTICOS EN EL HIPOTÁLAMO ESTÁN INVOLUCRADOS EN UNA MAYOR SUSCEPTIBILIDAD A UNA DIETA ALTA EN GRASAS SACAROSA EN PRENATALMENTE SUBRAYADO FEM

animals and experimental design

timed-pregnant wistar rats on gestation day 9 supplied by Harlan Iberica (barcelona, spain) were individually house in a temperature (21 1°C) and humidity- 55 %15) controlled room on a 12-hour light/dark cycle with food and water freely available. the pregnant rats were randomly assigned to two treat - ment groups, no-stressed. (NNS, N=11) and stress (S,N=11). Beginning on gestation day 14, dams from group S were subjected to an 8 - day schedule of variable stress (table 1). dams were weighed an food intake was measured daily throughout the stress period and subsequent lactation.

Each stress was applied during the light cycle unless noted otherwise. We selected a variable stress paradigm for our studies to prevent the animals from habitating to the stres. Stress was restricted to the 3rd week of gestation because the neural circuits regulating the HPA axis and energy homeostasis, including the hypothalamus, are rapidly developing during this period. The remaining control dams were exposed to normal animal room husbandry practices in the animanl facility. The day after ther stress paradigm finished, 24 hours fecak samples were collected and stored at -20°C.

The day the litters were born was designated posnatal day 0 (PND 0) and all pups were sexed. Only litters that contained 8-10 pups were included in the study and only femele rats were select ed for the different analyses

CAMBIOS TRANSCRIPTOMIC Y EPIGENÉTICOS EN EL HIPOTÁLAMO ESTÁN INVOLUCRADOS EN UNA MAYOR SUSCEPTIBILIDAD A UNA DIETA ALTA EN GRASAS SACAROSA EN PRENATALMENTE SUBRAYADO FEM

Las perturbaciones en el período prenatal están vinculados a los trastornos metabólicos en la edad adulta, lo que implica los sistemas hipotalámicos de apetito y energía regulación equilibrio. Con el fin de analizar los efectos centrales de una dieta alta en grasa-sacarosa (HFS), en el periodo prenatal subrayado (PNS) ratas hembras adultas, presas Wistar fueron expuestas a leve estrés crónico durante la tercera semana de gestación y luego se compararon con átona controles. Crías de la hembra adulta fueron alimentados con una dieta de comida o HFS durante 10 semanas. Se analizaron los cambios en el peso corporal, la obesidad, así como los niveles de expresión y de metilación de los genes seleccionados del hipotálamo. PNS indujeron menor peso al nacer y la longitud del cuerpo sin cambios en la masa grasa corporal. Después de la dieta HFS, el modelo de exceso de peso esperada se observó acompañado por una mayor adiposidad y la resistencia a la insulina, que fue agravada por PNS. El modelo de estrés inducido un mayor consumo de energía en la edad adulta. Análisis de la expresión génica hipotalámico reveló que la dieta HFS disminuyó SLC6A3 (dopamina transportador activo), NPY (neuropéptido Y) e IR (receptor de la insulina) y el aumento de POMC (proopiomelanocortina). Niveles de metilación del ADN del hipotálamo en la región promotora del SLC6A3 revelaron que SLC6A3 se hypermethylated por la dieta HFS en CpG sitio de -53 pb al sitio de inicio de transcripción. Dieta HFS también hypermethylated CpG sitio -167 pb del promotor POMC sólo en animales no estresados. No se encontraron correlaciones entre la expresión génica y los niveles de metilación del ADN. Estos resultados implican que el estrés-vida temprana en las mujeres aumento de la predisposición a la obesidad inducida por la dieta en la edad adulta

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