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Evaluación de antagonismo bacteriano con cepas ambientales


Enviado por   •  19 de Febrero de 2017  •  Trabajo  •  1.049 Palabras (5 Páginas)  •  196 Visitas

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Universidad Politécnica de Tlaxcala

Ingeniería Biotecnología

Evaluación de antagonismo bacteriano con cepas ambientales

Participantes: M.C. Eduardo Seynos García

Miguel Angel Cuapio Rodríguez

cuapiorodriguezmiguelangel@gmail.com

D.C.  Luis Ernesto Fuentes Ramírez

luis.fuentes@correo.buap.mx

Mtra. Reyna Muñoz Lara

reyna.munoz@uptlax.edu.mx

12-Diciembre-2016

Resumen

En este proyecto se presento el antagonismo que ocurre entre diferentes especies de plantas no relacionadas filogenéticamente, como lo fue higo,níspero y encino de la región de San Francisco Tepeyanco Tlaxcala, en se hicieron 12 aislamientos  empleando ensayos de antagonismo en doble capa detectamos tres cepas antagónicas. Utilizando secuenciación del gen 16S ribosomal ubicamos a nivel taxonómico a la cepa H2 como Variovorax sp. (Aislada de la planta de higuera) y a las cepas E2 y E3 como Bacillus sp. (Aisladas de encino). La cepa H2 inhibe microorganismos Gram positivos, mientras que las cepas E2 y E3 exhiben inhibición de amplio espectro. En los ensayos de antagonismo asociado a movimiento swarming se aprecia una zona clara de inhibición entre las cepas E2 y E3 probablemente relacionada a la producción de moléculas antimicrobianas. Así como la aplicación de pruebas bioquímicas llevadas en las diferentes cepas tales como tinción de Gram, prueba de oxidasa y catalasa. Se concluyo que estas bacterias pueden ser utilizadas como agentes de biocontrol ya que se consideran como bacterias no patógenas para las plantas.

Planteamiento

Los microorganismos epifitos son aquellos capaces de colonizar la filosfera de las plantas. La cantidad de nutrientes y agua, así como los espacios colonizables disponibles ejercen en las bacterias epifitas un ambiente de competencia a través de diferentes mecanismos. La eliminación de competidores por medio de la producción de moléculas antimicrobianas de amplio espectro (antibióticos) o de espectro reducido (bacteriocinas), o la competencia a través de movilidad tipo swarming (asociada a la producción de moléculas antimicrobianas o a sistemas de secreción tipo VI) fueron explorados en este trabajo en 12 aislamientos bacterianos epifitos de tres especies vegetales no relacionadas filogenéticamente: Encino (Quercus sp.), Higuera (Ficus carica) y Níspero (Eriobotrya sp.) de la región de San Francisco Tepeyanco Tlaxcala.

Justificación

El proyecto de antagonismo bacteriano en plantas puede ser utilizado en un futuro como pruebas de agentes de biocontrol como lo serán biofertilizantes que ayudan a la planta  de una manera más eficiente y sin contaminar el medio ambiente con sustancias tóxicas.

Objetivo  General

Realizar antagonismo de bacterias mediantes la producción de metabolitos antimicrobianos de diferentes plantas durante un periodo de tres meses.

Objetivos Específico

  • Utilización de medios ricos en nutrientes para el crecimiento de microorganismos
  • Utilización de cepas para inhibir a los diferentes microorganismos.
  • utilizando el método en doble capa con cepas sensibles y de control, para observar la formación de halos de inhibición.

Análisis del Contexto

El proyecto duro tres meses  fue desarrollado en el Centro de Investigaciones en Ciencias Microbiológicas de la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, hubo la partición del D.C. Luis Ernesto Fuentes Ramírez (Profesor Titular A Tiempo Completo),M.C. Luis Eduardo Seynos García (Estudiante de Doctorado En Ciencias Microbiológicas de dicho instituto) y de su servidor Miguel Angel Cuapio Rodríguez (Estudiante de Ingeniería en Biotecnología de la Universidad Politécnica de Tlaxcala).Dicho proyecto fue llevado en el Laboratorio de Ecología Molecular ,contando con la acreditación del Asociación Poblana de Ciencias Microbiológicas, así como la certificación del Instituto de Ciencias de dicha institución.

Desarrollo

Material

Equipo

Micropipeta 1000ul

Micropipeta 0.2-2ul

Micropipeta 5-10ul

Asa de platino

Asa de cristal

Tubos ependor

Tubos falcón

Puntas azules, amarillas y blancas

Colorante

Matraces de 500 ml

Matraces de 400 ml

Placas de cristal

Celdas

Portaobjetos

Cubreobjetos

Placas de plástico

Encendedor

Plumones

Papel filtro

Cloroformo

Algodón

Alcohol

Hisopos

Gel de agarosa

Peines de 4 dientes

Safranina

Lugol

Alcohol-cetona

Azul-Violeta

Agua Oxigenada

Agua estéril

Enzima oxidasa

Enzima Taq Polimerasa

Nacl

Peptona de Caseína

Extracto de levadura

Agar Bacteriano

Termociclador

Espectrofotómetro

Campana

Shaker

Centrifuga

Vortex

Autoclave

Potenciómetro

Cámara de banda

Cámara de electroforesis

Microscopio

Microondas

Refrigerador

Parilla

Metodología

...

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