La Influencia

MATERIALES Y MÉTODOS

1. LUGAR DE ESTUDIO

Para el desarrollo del presente trabajo se muestreó 124 perros escogidos al azar, con edades comprendidas entre uno y diez años de edad, sin distinción de sexo ni raza en los distritos de San Martín de Porres, Rímac y Lima aledaños a la ribera del río Rímac, en la provincia de Lima.

2. TAMAÑO DE MUESTRA

El tamaño muestral fue hallado mediante la siguiente fórmula:

n = Z² pq

E²

Donde:

n = tamaño de muestra

Z = 1.96 (95% de confianza)

p = proporción de positivos (0.0882); (referencia de Hernández, 1958)

q = proporción de negativos (0.9118)

E = precisión de estimación (0.05)

Tamaño muestral 124 perros

La fórmula utilizada para la estratificación por distritos fue la siguiente:

NH

nH = ----------- (n)

N

Donde:

nH = Tamaño de muestra del estrato

NH = Tamaño de población del estrato

N = Tamaño de la población

n = Tamaño de muestra calculado

Obteniéndose el siguiente tamaño muestral por distrito:

San Martín de Porres : 63 perros

Lima : 29 perros

Rímac: 32 perros

3. OBTENCIÓN DE MUESTRAS

3.1 MATERIALES

Para llevar a cabo el estudio, se utilizaron los siguientes equipos y materiales:

Agujas para vacutainer #21

Algodón

Alcohol

Azul de metileno 1:1000

Bálsamo de Canadá

Caja térmica

Centrífuga

Formol al 2%

Kit de diagnóstico de ELISA - Dirochek (Laboratorio Synbiotics)

Láminas porta objetos

Láminas cubre objetos

Micro centrífuga

Microscopio de luz convencional

Micro pipetas de precisión

Pipeta graduada

Plastilina

Tubos de centrífuga

Tubos microcapilares de micro centrífuga sin anticoagulante

Tubos de vacutainer de 7 cm

3.2 COLECCIÓN DE SANGRE

Las muestras de sangre fueron tomadas entre las horas 6:00 - 7:00 pm y 7:30 - 9:00 am, en perros procedentes de los distritos de San Martín de Porres, Rímac y Lima en Lima metropolitana, escogidos al azar en perros caseros y perros callejeros mayores de 1 año de edad, sin distinción de sexo y raza. Todos estos datos fueron recopilados en las fichas de identificación de los perros

Se extrajo 3.0 ml de sangre de la vena cefálica utilizando el equipo de vacutainer estéril con anticoagulante, y se procedió al traslado de las muestras en una caja térmica con gel refrigerante al laboratorio de parasitología de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos para su posterior análisis

4. MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO SEROLOGICO

4.1 MÉTODO DEL MICRO CAPILAR (TEST DE WOO)

Para la realización de esta prueba se procedió al llenado de los microcapilares y al posterior sellado de uno de los extremos con plastilina. Las muestras fueron llevadas a centrifugar a 12 800 rpm por 5 minutos luego de lo cual se realizó la lectura del porcentaje del volumen del paquete celular y la observación de la zona flogística para determinar la presencia de las microfilarias con la ayuda de un microscopio de luz convencional.

El inconveniente de este método es de no se poder diferenciar entre las microfilarias de Dirofilaria immitis y de Dipetalonema reconditum.

4.2 TEST DE KNOTT MODIFICADO

Esta prueba nos permite hacer un examen morfológico microscópico para poder realizar la diferenciación de las larvas de D. immitis de las de D. reconditum.

El

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