Actividad 3.2 Tinción Gram

Actividad 3.2 Tinción Gram

Parte I: Racional científico

La tinción Gram es una de las tinciones más utilizadas en los laboratorios clínicos. La misma representa uno de los análisis principales en la identificación de las bacterias. La tinción Gram es una tinción diferencial, es decir permite diferenciar entre las bacterias Gram-positivas y las bacterias Gram-negativas.

La tinción Gram se basa en la manipulación de cuatro reactivos principales.

1) Añade cristal violeta (tinte primario) por 60 segundos y lavar con agua corriente.

2) Añade yodo (mordante) por 60 segundos.

3) Descolora con alcohol o alcohol-acetona por, aproximadamente, 30 segundos y lava con agua corriente.

4) Añade safranina por 60 segundos (contra tinte) y lavar con agua corriente.

Al completar la tinción, seca la laminilla y observa bajo el microscopio en el objetivo de inmersión en aceite (100X). Esto permite evaluar la morfología, el arreglo y el tamaño de las bacterias. Normalmente, la tinción Gram se realiza en su totalidad y luego se examina la laminilla bajo el microscopio. Ahora, considera los dos escenarios que se describen a continuación.

En el primer escenario, considera que estás realizando una tinción Gram y, luego de cada paso, examina la laminilla bajo el microscopio. ¿Cómo crees que se verían las bacterias Gram-positivas y las bacterias Gram-negativas?

En el segundo escenario, considera que en un laboratorio clínico de un hospital surge una situación confusa con relación a una tinción Gram y que te consultaron a ti. Un tecnólogo médico identificó un coco Gram-positivo como el agente causal de una infección urinaria en un paciente. La bacteria fue identificada como Staphylococcus saprophyticus. Sin embargo, la tinción Gram fue repetida y el resultado obtenido fue un coco Gram-negativo. ¿Cuál será el problema?

Parte II: Luego de estudiar el módulo 3, contesta las siguientes preguntas: (Valor: 20 puntos)

Las preguntas 1 y 2 se relacionan con el primer escenario y las preguntas 3 y 4 se relacionan con el segundo escenario.

1. Completa la tabla considerando lo que pasaría si observaras la laminilla bajo el microscopio luego de añadir cada reactivo. Considera las siguientes preguntas guía (valor: 8 puntos):

A) ¿Qué color tendrá una bacteria Gram-positiva luego de añadir cristal violeta?

B) ¿Qué color tendrá una bacteria Gram-positiva luego de añadir yodo?

C) ¿Qué color tendrá una bacteria Gram-positiva luego de añadir alcohol?

D) ¿Qué color tendrá una bacteria Gram-positiva luego de añadir safranina?

E) ¿Qué color tendrá una bacteria Gram-negativa luego de añadir cristal violeta?

F) ¿Qué color tendrá una bacteria Gram-negativa luego de añadir yodo?

G) ¿Qué color tendrá una bacteria Gram-negativa

...