Frotiss

FROTIS

Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separarlo más posible los microorganismos

PREPARACIÓN DE UN FROTIS

• Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio
• Flamear el asa de siembra
• ,tomar, en condicionesasépticas, una pequeñacantidad del cultivobacteriano en medio sólido ytransferirlo a la gota deagua.
• Remover la mezcla con el asade siembra hasta formaruna suspensión homogéneaque quede bastanteextendida para facilitar susecado

Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación acercano el porta bjetos a la llam del mechero

IJACIÓN DE LAS BACTERIAS ALPORTAOBJETOS

Por calor: Pasar tres veces el portaobjetos por la llamadurante unos segundosCon metanol (para bacterias procedentes de mediolíquido). Añadir unas gotas de metanol sobre laextensión completamente seca.

Esperar a que el metanol se evapore completamente s evapore completamente.

TINCIÓN DEL FROTIS BACTERIANO

Cubrir el frotis con abundante colorante ydejarlos actuar durante el tiempo que indiqueel protocolo de cada tinción concreta. Sueleoscilar entre 1 y 5 minutos.

Lavar la preparación conagua para eliminar el colorante.

Estaoperación se realizainclinando elportaobjetos yaplicando el chorro deagua en su partesuperior de maneraque resbale sobre elfrotis, pero sin quevaya dirigidodirectamente sobre él,pues podría arrastrarparte del frotis consigo

Secar el porta presionando entre dospapeles filtro, pero en ningún caso sedebe frotar el portaobjetos.

Observar la preparación al microscopio

MONTAJE DEFINITIVO DE LA PREPARACIÓN

Pasar sucesivamente los portaobjetos por las siguientes soluciones manteniéndolos un mínimo de 5 minutos en cada baño. El objetivo es que la preparación quedetotalmente deshidratada. Escurrir bien el reactivoantes de introducirlo en el siguiente baño.

• Alcohol de 70º
• Alcohol de 95º
• Acetona pura
• Acetona-xilol(1:1)
• Xilol

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