Transaminasas

INTRODUCCION: TGO es una enzima bilocular. La vida media de la TGO es de 17 Hs. (TGP: 47Hs) lo cual da una información muy actual de la realidad de un proceso citolítico. Es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en el músculo del corazón, las células del hígado, las células del músculo esquelético y en menor cantidad en otros tejidos. Aunque un nivel elevado de AST en suero no es específico de enfermedad hepática se emplea principalmente para su diagnóstico y seguimiento, junto con otras enzimas como la ALT y ALP. También se utiliza en el control post-infarto, en pacientes con desordenes del músculo esquelético, y en otras afecciones.

La TGP es una enzima intracelular, se encuentra principalmente en las células del hígado y el riñón. Su mejor aplicación es en el diagnóstico de las enfermedades del hígado.Se observan niveles elevados en enfermedades hepáticas como la hepatitis, enfermedades de los músculos y traumatismos. Cuando se emplean en conjunción con la AST ayuda en el diagnóstico de infartos de miocardio, ya que el valor de la ALT se mantiene dentro de los límites normales y aumenta en los niveles de AST

MATERIAL:

Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.

- Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC ( 0,1ºC)

- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.

- Tubos de ensaye

Muestra de suero

Reactivos

TGO: (R 1 Tampón TRIS pH 7,8 L-Aspartato) R 2( Substrato NADH Lactato deshidrogenasa (LDH) Malato deshidrogenasa (MDH) α-Cetoglutarato)

TGP: R 1(Tampón TRIS pH 7,8 L-Alanina R 2( Substrato NADH Lactato deshidrogenasa (LDH) α-Cetoglutarato)

PROCEDIMIENTO: Se mezclan los reactivos y se procede en el caso de TGO: en tubos de ensaye se realizan las siguientes preparaciones:

RT (mL) 1,0

Muestra (µ L) 100

Mezclar, incubar 1 minuto, leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto ( ΔA/min).

CALCULOS : ΔA/min x 1750 = U/L de AST Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L). Factores de conversión de temperaturas.

Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:

Temperatura

de medición Factor Para convertir a

25ºC 30ºC 37ºC

25ºC 1,00 1,37 2,08

30ºC 0,73 1,00 1,54

37ºC 0,48 0,65 1,00

Se mezclan los reactivos y se procede en el caso de TGP: en tubos de ensaye se realizan las siguientes preparaciones:

RT (mL) 1,0

Muestra (µ L) 100

Mezclar, incubar 1 minuto, leer la absorbancia (A) inicial de la muestra,

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