AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS DEL SUELO (PROPIEDADES BIOLÓGICAS)

AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS DEL SUELO (PROPIEDADES BIOLÓGICAS)

Práctica Diagnóstico de Suelos, Ingeniería Ambiental, Universidad de Medellín

Medellín, Colombia

Luz Tatiana Acosta Fuentes - 1193048023

Aura Vanesa Posada Pastrana - 1152468117

 María Alejandra Suaza Calle - 1010063997

Yurany Naranjo Vélez - 1007343630

RESUMEN

En la práctica de propiedades biológicas (aislamiento de microorganismos del suelo), se utilizó la técnica de diluciones sucesivas para cuantificar hongos y bacterias presentes en una muestra de suelo normal y una muestra de suelo neutralizada con 64g/kg de cal. Con el fin de evaluar las diferencias que generan estas variaciones, sobre la cantidad de UFC (unidades formadoras de colonias) presentes por cada gramo de suelo, a su vez se pretende evaluar el comportamiento de los hongos y las bacterias ante esta condición.

ABSTRACT:

In the practice of biological properties (isolation of microorganisms from the soil), the technique of successive dilutions was used to quantify fungi and bacteria present in a normal soil sample and a neutralized soil sample with 64g/kg of lime. In order to evaluate the differences that generate these variations, on the amount of CFU's (colony forming units) present per gram of soil, it is intended to evaluate the behavior of fungi and bacteria to this condition.

INTRODUCCIÓN

Los microorganismos son organismos ubicuos y en los ambientes naturales se encuentran usualmente como poblaciones mixtas, por lo que es necesario tenerlos como cultivos puros por medio de aislamientos, para así poder identificarlos y caracterizarlos. La preparación de un cultivo puro implica no solo el aislamiento de un determinado microorganismo, sino su mantenimiento y el de su descendencia.

Muchos microorganismos son utilizados en industria para obtener diversos productos como alimentos, bebidas, fármacos y combustibles orgánicos. Muchas investigaciones en ciencias biológicas utilizan estos microorganismos como modelo de estudio para entender fenómenos específicos como la producción eficiente de algún compuesto, mecanismos de adaptación e interacción en el medio ambiente, así como estudiar problemas de salud pública.

Es posible utilizar diferentes estrategias para el aislamiento e identificación de microorganismos: Separación física mediante diluciones seriadas y siembra en utilización de medios de cultivos selectivos y diferenciales, y aprovechamiento de características particulares de los microorganismos. Todo esto en pro de un beneficio, como, por ejemplo, encontrar su potencial de utilización en sistemas de tratamiento de aguas residuales.

MATERIALES Y MÉTODOS

Para la obtención de las propiedades biológicas en el suelo dentro de un laboratorio, se ejecutaron los siguientes métodos y procedimientos:

1. Aislamiento de microrganismos del suelo

1. Materiales y equipos:

• 2 muestras de suelo (la #1 sin cal y la #2 con 64g/kg de cal).
• Sln de pirofosfato sódico al 0,5%.
• H2O estéril.
• Tubos de ensayo.
• Medio de cultivo para bacterias (agar nutritivo).
• Medio de cultivo para hongos (agar Sabouraud).
• Incubadora.

1. Procedimiento:

• Transferir 20 g de suelo sin cal (S0) a 180 ml de sln de pirofosfato sódico al 0,5%, agitar durante 1 minuto y marcar como 10-1.
• Tomar 1 mL de la sln anterior y diluirlo con 9 ml de H2O estéril, ésta será la dilución 10-2, repetir hasta obtener la dilución 10-7.
• Tomar 200 microlitos de dilución 10-5 y sembrar sobre agar Sabouraud (este medio es adecuado para hongos). Marcar debidamente la caja de Petri e incubar a 28º por 7-9 días.
• Tomar 200 microlitros de la dilución 10-7 y sembrar sobre agar nutritivo (medio para bacterias). Marcar adecuadamente la caja de Petri e incubar a 28º por 3-6 días.
• Repetir todo el procedimiento anterior, pero con una muestra de 20g de suelo con 64g/kg de cal (S64).
• En un periodo de 7 días, proceder a contar las UFC presentes en la caja de Petri.
• Mediante la siguiente ecuación determinar las UFC/g suelo para cada muestra:

= UFC/g suelo[pic 1]

Dónde:

• UFC/Plato: Unidades formadoras de colonias contadas en la caja de Petri.
• g muestra: Gramos de suelo iniciales (20g).
• UFC/g suelo: Unidades formadoras de colonias por gramo de suelo.

RESULTADOS

1. Determinación de la acidez intercambiable y pH del suelo:

• Para bacterias (10-7), Muestra S0:

• Para bacterias (10-7), Muestra S64:

• Para hongos (10-5), Muestra S0:

...