APLICACIÓN DE LA CÁMARA DE NEUBAUER Y TÉCNICAS DE CULTIVO CELULAR

APLICACIÓN DE LA CÁMARA DE NEUBAUER Y TÉCNICAS DE CULTIVO CELULAR

Introducción

Se realizaron dos laboratorios que consistieron en observar con el microscopio óptico una microalga añadida en una cámara de Neubauer. Y en el otro laboratorio preparar tres medios de cultivo con diferentes muestras bacterianas.

Laboratorio N°1

Materiales y métodos

• Microscopio óptico
• Cámara de Neubauer
• Vaso precipitado
• Micropipeta
• Microalga (Tetraselmis suecica)

Para realizar la observación se diluyo la muestra en 1:10 de 120ml de microalga en un vaso precipitado para agregarse en la cámara de Neubauer con una micropipeta. Posteriormente se observa en un microscopio óptico y se realizó el conteo de células ubicadas en los cuatro cuadros grandes.

Resultados:

Estos resultados indican un total de 32 células dentro de los cuatro cuadros grandes de la cámara de Neubauer.

Concentración:      células en un microlitro.[pic 1]

Ya que la unidad esta en microlitros se pasa a mililitros para obtener la concentración final, es decir, 800.000 células en 1 ml.

Entonces en 120 ml que era la cantidad total de muestra de microalga se inocula una concentración de 96.000.000 de células.

Laboratorio N°2

Materiales:

• Vaso precipitado (1000 ml)
• 2 tórulas de algodón
• Microscopio óptico
• Guantes de látex
• 3 Placas Petri
• Mechero

Nutrientes para el cultivo:

• Varilla
• Pesa

Procedimiento:

Se toma un vaso pp de 1000 ml y se le agregan 500 ml de agua destilada, se pesan y se agregan los nutrientes necesarios. Una vez realizado esto se incluye el agar. Se agita con la varilla y se refrigera por una semana. Pasado el tiempo se lleva a ebullición y posteriormente se agita constantemente para evitar la formación de cúmulos en el fondo.

Una vez que esta lista la solución con los nutrientes, se colocan los guantes de látex para no contaminar los cultivos, y entonces se vierte el agar en 3 placas Petri desechables cerca de un mechero para evitar la contaminación del ambiente. Se dejan solidificar y luego de esto con la ayuda de las tórulas de algodón se extraen bacterias de suciedad de zapato y una muestra bucal, se siembran por separado sobre los medios de cultivo. El tercer medio de cultivo se deja unos minutos al ambiente. Posteriormente se disponen en una estufa a 37°C y se procede a observar luego de 48 horas, y pasado una semana se observan los resultados en microscopio.

...