BIOLOGÍA Y ECOLOGÍA MICROBIANA

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA CHAPINGO

         DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL        

BIOLOGÍA Y ECOLOGÍA MICROBIANA

GRUPO: 1         GRADO: 5

García Ledesma Luis Arturo, Gómez Hernández José Luis, Gopar Martínez Carlos Enrique, Pérez López Leticia Astrid.

Practica 4. Observación de hongos filamentosos

INTRODUCCIÓN

Los mohos reciben este nombre por ser hongos multicelulares, filamentosos, cuyo crecimiento en los alimentos es caracterizado por su aspecto aterciopelado o algodonoso (el alimento enmohecido se desecha como inadecuado para el consumo). La parte principal del hongo en crecimiento generalmente es blanca; a veces coloreada, obscurecida o como ahumada. Ciertos mohos maduros presentan esporas coloreadas que pueden dar color a parte o a toda la masa en crecimiento, los mohos están constituidos por unos filamentos ramificados y entrecruzados llamados hifas cuyo conjunto forma el llamado micelio. Las hifas son de dos clases sumergidas  o de crecimiento en la masa del alimento, encargadas de la nutrición, y aéreas o de crecimiento externo que son las que contienen los órganos reproductores. Según el tipo de hifa los mohos se pueden clasificar en septados que son los que dividen a la hifa en varias celdas y no septados cuyas hifas carecen de tabiques transversales.

OBJETIVOS

• Identificar estructuras básicas de diferentes muestras de alimentos con presencia de hongos filamentosos.
• Realizar una siembra de mohos en un medio de cultivo y analizar su crecimiento.
• Hacer un micro cultivo en un medio completamente esterilizado y analizar su crecimiento.

METODOLOGÍA

Materiales y equipo

Muestras de alimentos con presencias de mohos

-jitomate

-manzana

-tortilla

-girasol

Portaobjetos

Cubreobjetos

Cinta durex

Microscopio óptico

Azul de lactofenol

Azul de metileno

Caja de Petri

Asa de inoculación

Cuenta colonias

Agua glicerinada

Mechero

cuchillo esterilizado

Varilla de vidrio en forma triangular  

Pipeta

PDA (Papa-Dextrosa-Agar)

Estructuras básicas

Técnica del durex

Para esta técnica se coloco una gota pequeña de azul de metileno sobre el portaobjetos; en la muestra de alimentos con presencia de mohos se adhirió una tira de cinta durex para desprender cierta cantidad de moho. Después la tira de cinta se colocó sobre el portaobjetos y se observó al microscopio.

Preparación den fresco

Para esta técnica se colocó una gota pequeña de azul de metileno sobre el portaobjetos; con el asa de inoculación (con la punta en forma de gancho) se extrajeron de las muestras una pequeña cantidad de mohos y se colocaron sobre el portaobjetos, posteriormente se asentó un cubreobjetos (evitando la presencia de aire) y se observó al microscopio.

Siembra de mohos

Se dividieron a la mitad las dos cajas de Petri que contenía PDA de acuerdo a las cuatro muestras que teníamos. Seguido de esto se marcaron tres puntos de inoculación para ambas mitades; se extrajo una pequeña cantidad de mohos de cada una de las muestras con ayuda del asa de inoculación (la punta en forma de alfiler) y se colocó en cada uno de los puntos marcados según la respetiva muestra. Se cubrió con la tapa de la caja y se llevó a la incubadora. Después de 48 se observó su crecimiento con ayuda del cuenta colonias, identificando las características que presentaba el cultivo.

Microcultivo 

En una caja de Petri se fracciono en cuadros pequeños con un cuchillo esterilizado el PDA, inmediatamente se colocó un cuadro en el portaobjetos que estaba dentro de la caja de Petri esterilizada con ayuda del asa de inoculación (punta en forma de cuchara) en seguida se sembraron los mohos de las respectivas muestras en cada una de las aristas del cuadro de PDA con ayuda de otra asa de inoculación (con la punta en forma de alfiler), posteriormente  se asentó el cubreobjetos con ayuda del asa de inoculación (punta en forma de cuchara), se agregaron 10mL de agua glicerinada con ayuda de la pipeta dentro de la caja y se llevó a la incubadora.

96 horas después se sacaron los microcultivos de la incubadora y se analizaron de la siguiente manera:

1.- pusimos una gota de lactofenol sobre el portaobjetos 1

2.- se retiró el cubreobjetos del microcultivo y se colocó sobre el portaobjetos 1

3.- se desprendio el cuadro de PDA con ayuda del asa de inoculación

4.- se colocó otra gota de lactofenol sobre el portaobjetos 2 del microcultivo

5.- se asentó un cubreobjetos

6.- se observó al microscopio y se registraron observaciones    

RESULTADOS

Estructuras básicas

...