Biología. Demostrar in vitro la actividad enzimática de los peroxisomas en diferentes células.
Enviado por Angie Avalos Yañez • 5 de Julio de 2016 • Práctica o problema • 1.305 Palabras (6 Páginas) • 377 Visitas
Objetivos
Demostrar in vitro la actividad enzimática de los peroxisomas en diferentes células.
Introducción
Todas las células posee metabolismo este es un proceso químico que se desarrolla en el interior del organismo o en alguna de sus pates. Comprende: el catabolismo que tiene como función desintegrar los compuestos orgánicos y liberar energía, el anabolismo cuya función es la elaboración de compuestos complejos a partir de compuestos más simples. El metabolismo de los seres vivos es muy parecidos.
El control del metabolismo es mantener las condiciones de vida óptima desarrollando mecanismos de defensa contra los agentes “desorganizadores”. El resultado de estas actividades de control se llama estado de equilibrio u homeostasis. Todos los seres vivos comparten el mismo modelo de homeostasis basado en los siguientes componentes: enzimas, genes y vitaminas. En todos los niveles de los seres vivos se hallan actividades que aumenta o disminuye la cantidad de enzimas. Pero los procesos de los eucariótico son aún muy desconocidos. Los mejores resultados se han obtenido con procarióticos. Este tipo de células es mucho más fácil de criar que las eucariotas, y se prestan más a los experimentos. Existen muchos niveles de regulación a nivel celular por ejemplo los orgánulos suelen tener múltiples actividades reguladoras.
Ejemplo de actividad de la enzima
MnO2 + H2O 2H2O + MnO2[pic 1]
Ensayo 1: Tomar 3 tubos y numerarlos de 1 al 3. Colocar en cada tubo 2ml de peróxido de hidrogeno. Luego en el tubo 1 colocar ½ cucharadita de hígado entero de pollo, en el tubo 2, colocar ½ cucharadita de hígado de pollo triturado y en el tubo 3, colocar 2g de Dióxido de manganeso. Pasado 5 minutos colocar en cada boca de tubo un fosforo encendido. Si el palillo encendido. Si el palillo encendido aumenta la intensidad la reacción es positiva.
Ensayo 2: Colectar, papas, apio e hígado, aproximadamente 100gr de cada uno y dividirlos equitativamente. La mitad de cada muestra ponerlos a cocer por un tiempo de 30 minutos.
Pasado este tiempo armar una batería de ensayo según los cuadros que siguen a continuación, en todos los casos ejecutar de la siguiente manera:
En un tubo de prueba poner 10gr. De muestra (papa, apio, hígado), agregar 5ml de peróxido de hidrógeno, homogenizar y luego tapar el tubo de prueba con el dedo pulgar cubierto con guantes de látex y agitar vigorosamente por 5min, pasado este tiempo colocarse en el lavandero y retirar cuidadosamente el dedo observar y anotar
RESULTADOS:
PRIMERA PRUEBA | |||
Tubo | Papa cocida | H2O2 | Observación |
1 | Machacada | 5ml | No hay ninguna reacción |
2 | En trozos | 5ml | No hay ninguna reacción |
3 | Machacada con 4gts de HNO3 | 5ml | Se quema pero en menor reacción |
4 | Machacada con 1ml de etanol | 5ml | No hay ninguna reacción |
5 | Machacada con 4gts de H2SO4 | 5ml | Se quema o se vuelve negro |
Tabla 1. Reacciones de la primera prueba, con papa cocida.
SEGUNDA PRUEBA | |||
Tubo | Apio cocido | H2O2 | Observación |
1 | Machacada | 5ml | No hay ninguna reacción |
2 | En trozos | 5ml | No hay ninguna reacción |
3 | Machacada con 4gts de HNO3 | 5ml | Se quema pero en menor reacción |
4 | Machacada con 1ml de etanol | 5ml | No hay ninguna reacción |
5 | Machacada con 4gts de H2SO4 | 5ml | Se quema o se vuelve negro |
Tabla 2. Reacciones de la segunda prueba, con apio cocido.
TERCERA PRUEBA | |||
Tubo | Hígado cocido | H2O2 | Observación |
1 | Machacada | 5ml | No hay ninguna reacción |
2 | En trozos | 5ml | No hay ninguna reacción |
3 | Machacada con 4gts de HNO3 | 5ml | Se quema pero en menor reacción |
4 | Machacada con 1ml de etanol | 5ml | No hay ninguna reacción |
5 | Machacada con 4gts de H2SO4 | 5ml | Se quema o se vuelve negro |
Tabla 3. Reacciones de la tercera prueba, con hígado cocido.
CUARTA PRUEBA | |||
Tubo | Papa cruda | H2O2 | Observación |
1 | Machacada | 5ml | Mayor liberación de gas O2 |
2 | En trozos | 5ml | Media liberación de gas O2 |
3 | Machacada con 4gts de HNO3 | 5ml | Pequeña liberación de gas O2 |
4 | Machacada con 1ml de etanol | 5ml | Metabolizo el etanol y subió un poco más pero no se compara con las otras |
5 | Machacada con 4gts de H2SO4 | 5ml | Se quemó y libero poco gas |
Tabla 4. Reacciones de la cuarta prueba, con papa cruda.
QUINTA PRUEBA | |||
Tubo | Apio crudo | H2O2 | Observación |
1 | Machacada | 5ml | Mayor liberación de gas O2 |
2 | En trozos | 5ml | Media liberación de gas O2 |
3 | Machacada con 4gts de HNO3 | 5ml | Pequeña liberación de gas O2 |
4 | Machacada con 1ml de etanol | 5ml | Metabolizo el etanol y subió un poco más pero no se compara con las otras |
5 | Machacada con 4gts de H2SO4 | 5ml | Se quemó y libero poco gas |
Tabla 5. Reacciones de la quinta prueba, con apio crudo.
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