Boquimica

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

Escuela Académico Profesional De Ingeniería En Industrias Alimentarias

INFORME DE PRACTICA N° 2: “Determinación De La Actividad Enzimática”

CURSO: Bioquímica-Practica

ALUMNO: Chamay Cuzco Luis Miguel

PROFESOR:

CICLO: 2014-III

Cajamarca, Abril del 2014

DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

I. RESUMEN:

En la práctica de laboratorio se determina la actividad enzimática de la Amilasa Salival que es una enzima presente en los seres humanos que sirve para degradar Almidón en Glucosa y Maltosa. En el desarrollo de la práctica se utilizan soluciones de reactivos como almidón que se utiliza como el sustrato con que se va a ser reaccionar la enzima (amilasa salival), cloruro de sodio, ácido clorhídrico, solución yodada que se utilizan como marcadores para identificar si hay actividad enzimática la actividad enzimática. Se utiliza tres etapas cada una con dos sistemas con reactivos diferentes pero con un mismo sustrato y enzima para identificar diferentes reacciones en cada etapa y sistema lo que explica la presencia y/o ausencia de la actividad enzimática sobre el sustrato (almidón).

Utilizamos conocimientos y estudios previos por nosotros y distintos autores que hayan revisado e identificados propiedades, características entre otros aspectos sobre las enzimas, sustrato, cofactores que nos ayudan a un mejor desarrollo practico y teórico del tema estudiado para poder interpretar los resultados obtenidos durante el proceso experimental como por ejemplo el significado del color de cada reacción en cada una de las etapas, la identificación del producto si es que hay reacción. El método utilizado en la determinación de la actividad enzimática es experimental con la guía y observación de una persona que sepa el manejo de los instrumentos y reactivos que se utilizan en el desarrollo de esta práctica para que no haya ninguna falla ni alteración de los resultados obtenidos y poder conocer la importancia de las enzimas en las reacciones químicas desarrolladas en nuestro cuerpo.

II. INTRODUCCIÓN:

Las enzimas pueden ser descritas como catalizadores complejos de origen. Biológico que tienen un alto grado de especificidad y eficiencia, esto permite que las reacciones químicas dentro de la célula ocurrieran rápidamente a través de vías bien definidas. Sin estas proteínas especializadas, la vida tal como es no podría existir.

Para poder demostrar la actividad enzimática se debe tener presente fundamentalmente que la acción catalítica de las enzimas es de carácter específico. Es decir, cada reacción química debe ser catalizada por una determinada enzima.

Existen diversos tipos de enzimas, cuya funcionalidad es muy variada. Las enzimas contribuyen al desdoblamiento de las moléculas de los principios nutritivos (proteínas, grasa y carbohidratos) en otras más pequeñas durante la digestión de los alimentos. Asimismo, facilitan su paso a la sangre a través de la pared intestinal; catalizan la formación de moléculas grandes y complejas con el fin de producir los constituyentes celulares, y favorecen el almacenamiento y gasto de energía. Las enzimas. También actúan en las funciones de la reproducción. Procesos de la respiración. Y en todos los demás mecanismos orgánicos.

“En el desarrollo .de la práctica nos centramos en una de ellas: la α-amilasa salival, todo esto para demostrar la actividad enzimática que posee (o no) para degradar el almidón en productos más simples como la maltosa, a dextrina limitante y glucosas; basándonos en la presencia de precipitados y distintas coloraciones obtenidas utilizando los reactivos adecuados para ello. Para medir si hay o no actividad enzirnática. Se puede realizar de dos maneras.

a. Controlando el sustrato no transformado (sustrato residual).

b. Controlando los productos liberados después de un tiempo determinado de incubación en condiciones específicas de pH y temperatura.

La finalidad de este trabajo experimental es determinar la actividad de la amilasa salival; enzima que como la pancreática tiene la capacidad de producir la degradación del almidón, maltosa para formar glucosa.

A. OBJETIVOS:

 El objetivo principal de esta práctica es que tiene que llevarse a cabo procesos experimentales en la práctica de laboratorio para determinar la actividad enzimática, utilizando a la enzima AMILASA SALIVAL que es una enzima que tiene la capacidad de producir degradación del almidón en maltosa que es un (disacárido reductor) y algo de glucosa a partir de las reacciones. También se tiene que tener en cuenta los factores que están involucrados en la determinación de la actividad enzimática.

­ Utilizando como enzima la u-amilasa salival y como sustrato almidón. el participante será capaz de demostrar la actividad enzimática (catalítica) de esta enzima, determinando:

a. La presencia del almidón no transformado (sustrato residual).

b. Determinando la presencia de carbohidratos reductores (productos de la reacción).

­ Reconocer la conformación del sistema enzimático: Enzima-Coenzima-Sustrato, y observar el proceso de la actividad enzimática.

Objetivos específicos:

­ Reconocer al NaCl como cofactor de la amilasa salival.

­ Demostrar la presencia de azucares reductores a traces de la utilización del reactivo de Benedict.

­ Reconocer el sustrato residual utilizando solución yodada.

­ Demostrar la formación de productos como la consecuencia de la actividad enzimática de la amilasa salival.

B. MARCO TEÓRICO:

1) Definición de enzimas, sustrato y cofactores:

a) Enzimas:

Las enzimas son proteínas que son también conocidas como biocatalizadores o catalizadores biológicos que ayudan a que las reacciones químicas ocurran con mayor rapidez. Sin enzimas nuestros cuerpos se detendrían en seco.

Esto aumenta la probabilidad de que las moléculas de reactante lleguen a un estado mínimo de energía para que se produzca la reacción.

Propiedades de las enzimas:

 Aumentar la velocidad de una reacción al disminuir la barrera de energía de activación.

 No se consume ni sufre cambio permanente de su estructura durante el proceso catalítico.

 No altera la posición de equilibro de la reacción, solo la velocidad al cual se alcanza dicho equilibrio.

 Por lo general, actúan formando un complejo transitorio con el reactivo, estabilizando así el estado

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