COOMB´S DIRECTO

TÍTULO: COOMB´S DIRECTO

1. OBJETIVO:

        Una prueba de laboratorio muy útil para demostrar anticuerpos ligados al eritrocito, es la         prueba de la antiglobulina humana directa o prueba de Coomb’s directo. Esta cuando es         positiva nos indicaría solamente la presencia de Ac ligados al antígeno eritrocitario.

Posteriormente, debe obtenerse al Ac en solución por medio de las técnicas del despegado (elusión) para poder estudiar su especialidad. Estas técnicas se basan en procedimientos físicos y/o químicos aplicados al eritrocito recubierto de Ac y que rompen su unión.

1. ALCANCE:

• Para los Licenciados en laboratorio clínico que laboran en el Servicio de Medicina Transfusional de Solca, encargados de ejecutar este procedimiento.

1. RESPONSABILIDAD:

• Cada funcionario (profesional o técnico que entre sus funciones asignadas estén las pruebas inmunohematológicas especiales y pretransfusionales) será responsable del estricto cumplimiento de este procedimiento.
• El Responsable Administrativo Financiero, será el encargado de asegurar los recursos imprescindibles para la realización de éste procedimiento y de velar porque se haga de manera racional para evitar insuficiencia o desperdicios innecesarios.
• El Responsable de Aseguramiento de la Calidad, mediante las inspecciones y auditorias controlará el cumplimiento de lo establecido en el presente POE.

1. DOCUMENTOS DE REFERENCIA:

• Estándares de Medicina Transfusional de la OPS.
• Normas de la AABB.

1. DEFINICIONES:

La destrucción precoz de los eritrocitos como en la Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido (EHRN), en las reacciones transfusionales hemolíticas o en la Enfermedad Hemolítica autoinmune, es en el primer caso, debida a anticuerpos (Ac) específicamente dirigidos a Antígenos (Ags), contra los eritrocitos del bebé, quien posee Ags heredados del padre y de los que la madre carece. En el segundo caso, los pacientes sometidos frecuentemente a transfusiones de eritrocitos, pueden desarrollar también Aloanticuerpos. Por el contrario, en el último de los casos el paciente afectado por una regulación defectuosa de su respuesta inmune, es capaz de desarrollar Ac (Autoanticuerpos) contra sus propios eritrocitos.

1. CONDICIONES DE SEGURIDAD:               

1. El talento humano incorporado para realizar este procedimiento, debe ser profesional, capacitado en inmunohematología con experiencia en laboratorio de Banco de Sangre y estar inmerso en un plan de capacitación continua y talleres de actualización.

1. LOCALES, EQUIPAMIENTOS, MATERIALES, REACTIVOS E INSUMOS:

• Local: Laboratorio del Banco de Sangre
• Equipamiento: Serófuga ,microscopio
• Materiales e insumos: Solución salina al 0.9%, Reactivo Anti- IgG

• Muestra con o sin anticoagulante. Se prefiere con anticoagulante para evitar la incorporación de     complemento in vitro.

1. PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO:

• Identificar la presencia de células sanguíneas sensibilizadas (hematíes). Detecta Ac IgG y/o C.
• Se realiza el procedimiento en los casos de:

• Anemia Hemoilítica Autoinmune (Auto anticuerpos).
• Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido (RN con CD+)
• Hemólisis por Fármacos (Hemólisis inducida por fármacos).
• Reacción hemolítica post transfusional (Aloinmunes – Ac adheridos a hematíes transfundidos).

1. OPERACIONES PRELIMINARES:

 Detección e identificación de anticuerpos anti – eritrocitarios; Pruebas de compatibilidad pretransfusionales; Tipificación de antígenos eritrocitarios que no son visualizados por aglutinación directa.

1. PROCEDIMIENTO

• Rotular dos tubos de ensayo con letras CD y T.
• Adicionar una gota de hematíes en cada tubo, lavar tres veces las células con solución salina al 0.9%, decantar enérgicamente después de cada lavada.
• Agregar dos  gotas de Suero de Coomb´s en el tubo CD y dos gotas de solución salina en el tubo T.
• Mezclar suavemente y centrifugar x 15” a 3000 rpm.
• Resuspender el botón y observar en un fondo bien iluminado la presencia de aglutinación o hemolisis.
• Verificar al microscopio la presencia de microaglutinación.
• Si el resultado es negativo, añadir una gota de Control de Coomb´s a cada tubo.Centrifugar x 15” a 3000 rpm.
• Resuspender el botón y observar en un fondo bien iluminado la presencia de aglutinación o hemolisis.
• Si aglutina el tubo CD posterior al agregar el Control de Coomb´s, significa que el procedimiento ha sido realizado de manera adecuada y el resultado es NEGATIVO.

1. DOCUMENTOS Y REGISTROS:

• Registro de pruebas pretransfusionales y/o especiales.
• Sistema informático administrativo.

1. ANEXOS:

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