Características macroscópicas y microscópicas de cultivos bacterianos

CARACTERIZACION MACROSCOPICA Y MICROSCOPICA DE CULTIVOS BACTERIANOS

OBJETIVO GENERAL

Reconocer las diferentes morfologías macro y microscópicas de los bacterios, mediante la descripción de los diferentes atributos (tamaño, forma, color, olor, consistencia, etc.) macroscópicos y sensoriales, y de las diferencias de forma y tinción al nivel microscópico.

OBJETIVOS PARTICULARES

• Apropiarse de la destreza requerida en la manipulación de cultivos microbianos realizados en medios sólidos y líquidos dispuestos en cajas de petri y tubos de ensayo.

• Reconocer los diferentes cultivos microbianos en medio sólido mediante la descripción de sus atributos macroscópicos

• Reconocer las formas microscópicas de los diferentes cultivos bacterianos aplicando técnicas de preparación de muestras fijas y coloraciones compuestas diferenciales

MATERIALES

Cada grupo debe tener:

Agar Nutritivo 1 caja

Caldo Nutritivo 1 caja

Isopo de Algodón 1 unidad

Asa bacteriológica Redonda 1 unidad

Set de coloración de Gram

Set coloración de Esporas

Tinta China

REACTIVO BIOLOGICO

Una cultivo de cada uno de los siguientes microorganismos en agar nutritivo o agar soya tripticasa (casoy) de 24 a 72 horas de incubación.

• Micrococcusluteus

• Streptoccocusfaecalis

• Staphylococcusaureus

• Escherichiacoli

• Pseudomonasaeruginosa

• Klebsiellapneumoniae

• Acinetobacterbaumanii

• Proteus vulgaris

Una cultivo de cada uno de los siguientes microorganismos en agar soya tripticasa (casoy) suplementado con sulfato de manganeso (3 g/l) al menos 72 horas de incubación.

• Bacillussubtilis

• Bacilluscereus

• Bacillusthuringiensis

Una cultivo de cada uno de los siguientes microorganismos en agar MRS de 24 a 72 horas de incubación.

• Lactobacillusplantarum

NOTA: todos los cultivos deben ser sembrados por agotamiento con el fin de poder observar colonias aisladas de cada uno de los modelos.

PROCEDIMIENTO

Descripción Macroscópica De Los Cultivos Microbianos Modelo

• Tome uno de cultivos en agar y agar una descripción macroscópica de todos sus atributos (tamaño, forma de la colonia, borde, elevación, brillo, color, olor, textura, consistencia, etc.).

Descripción Microscópica De Los Cultivos Microbianos

Reacción a la coloración de Gram, forma y agrupación

• Tome una lámina portaobjetos limpia y coloque una gota pequeña de solución salina isotónica (NaCl al 0,9% P/V).

• Con ayuda del asa bacteriológica y mediante la aplicación apropiada de la técnica aséptica tome una muy pequeña muestra de alguna de las colonias que crece sobre el agar

• Disperse suavemente la muestra en la gota se solución salina y esparza la suspensión formada sobre la lamina porta objetos

• Encienda el mechero y pase la lámina con la muestra sobre la llama varias veces, evitando un calentamiento excesivo, hasta que la muestra que completamente seca y luego de eso continúe calentando por un minuto más.

• Coloque la lámina en el puente de coloración y realice la coloración de Gram.

• Haga la observación respectiva en 1000X determine forma, agrupación y si es Gram Positivo o Gram Negativo

Presencia de Esporas

• Tome una lámina portaobjetos limpia y coloque una gota pequeña de solución salina isotónica (NaCl al 0,9% P/V).

• Con ayuda del asa bacteriológica y mediante la aplicación apropiada de la técnica aséptica tome una muy pequeña muestra de alguna de las colonias de los cultivos de B. subtilis, B. cereus, B. thuringiensis, E. coli y Lactobacillus plantarum.

• Disperse suavemente la muestra en la gota se solución salina y esparza la suspensión formada sobre la lamina porta objetos

• Encienda el mechero y pase la lámina con la muestra sobre la llama varias veces, evitando un calentamiento excesivo, hasta que la muestra que completamente seca y luego de eso continúe calentando por un minuto más.

• Coloque la lámina en el puente de coloración

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