Cinética bacteriana

Metodología:

Para demostrar la cinética de dicha bacteria se siguieron dos métodos:

• Método 1: Inoculación tubo por tubo cada 2 horas para analizar contra el tiempo.

En total se necesitaron catorce tubos Hach (uno se utilizó para el cultivo madre de E. coli, otro más como blanco, es decir, no se inoculó bacteria; y los doce restantes para las inoculaciones que se describirán a continuación).  

A partir de un cultivo madre de E.coli, se inoculó en un tubo Hach nuevo con medio L.B. (por duplicado). Cada dos horas se inocularon 200µL de E.coli a partir del mismo cultivo madre en un tubo nuevo con 6mL de medio L.B.  

Inmediatamente se realizaron las lecturas de absorbancia inicial en un espectrofotómetro Hach DR 5000 a una longitud de onda de  540nm, sin olvidar que se tiene que medir el blanco para ajustar a cero antes de la medición. Posteriormente se incubaron a 37°C y 250 rpm y se realizaron 6 repeticiones en total a lo largo del día.

Finalmente se midieron las absorbancias finales de cada tubo, estos datos se graficaron para observar el comportamiento exponencial en la cinética de la bacteria.

• Método 2: Una sola inoculación,  análisis de su absorbancia cada 2 horas.

Se necesitaron cuatro tubos en total. Se inocularon 200μL de la bacteria en 6μL de medio L.B. por triplicado. El tubo restante se tomó como blanco.

Se realizó la lectura de la absorbancia en el espectrofotómetro Hach DR 5000 y se incubaron a 37°C y 250rpm. Los tubos se volvieron a analizar en el espectrofotómetro  cada dos horas y se regresaban a la incubadora hasta haber cumplido doce horas.  En total se realizaron seis repeticiones y se graficaron para observar su comportamiento.

Resultados:

• Método 1: Tubo por tubo

Tabla 1) Inoculación en tubo nuevo cada 2hrs. Lecturas iniciales y al final del día.

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