Conceptos básicos en Cultivo Celular

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Conceptos básicos en Cultivo Celular

Curso: Biología y Genética Molecular Johany Cecilia Sánchez Guillen

CD: 9518 jsanchezg@ucsm.edu.pe

• ¿Las células animales son autosuficientes?
• ¿Qué es necesario para que una célula pueda sobrevivir?
• ¿Cómo es el siglo natural de una célula animal?
• ¿Todas las células viven el mismo periodo de tiempo?
• ¿Cómo cicatrizan nuestras heridas?

¿Es posible recrear las necesidades de una célula animal ex vivo?

•         1907: Ross Harrison y el Instituto de Rockefeller realizaron un cultivo de tejido embrionario de rana en plasma -> 1 a 4 semanas.
• 1912: Alexis Carrel, preserva y el prolongamiento de la vida de las células fuera de los embriones -> acumulación de sustancias, falta de nutrientes.
• 1948: Katherine Sanford et al. Cultivo de células separadas no tejidos.
• 1955: Harry Eagle -> creación de un medio arbitrario de aminoácidos, vitaminas, co-factores, carbohidratos, sales y proteína sérica.

¿Qué es necesario para que una célula pueda sobrevivir?

• Esterilidad        • Nutrientes[pic 2]

• Oxígeno        • Superficie

• Temperatura        • pH

• Todo depende del peligro de una infección.[pic 3]
• Barrera de defensa: piel
• Ejercito de defensa: linfocitos

A no ser que recreemos el sistema inmunitario, las células están a merced de patógenos.

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• Bata de laboratorio, guantes, mascarilla, etc.
• Ambiente aislado para cultivo: BSL2, BSL3, BSL4.
• Cabina de bioseguridad: Flujo laminar, BSL2[pic 5]
• Esterilización de medios de cultivo y soluciones: DMEM, PBS, etc.
• Esterilización de materiales de vidrio: matraces, botellas, etc.
• Esterilización de materiales de plástico: placas, tubos, pipetas, etc.[pic 6]

• Amino ácidos (Arg, Glu, Gly, Leu,

Ile, Met, Phe, Ser, etc)

• Vitaminas (D, A, complejo B)
• Glucosa
• Sales inorgánicas (Na, K, Mg, Ca)
• Rojo fenol
• Agua destilada

• DMEM
• MEM[pic 7]
• RPMI
• IMDM

• Rojo fenol: indicador de pH[pic 8]
• El pH del medio puede cambiar

por varias razones

• El medio tiene un tiempo de vida y debe cambiarse
• Otros factores de crecimiento: suplementos, factores de crecimiento.

• CO2 5%
• 37°C

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Laboratorio de cultivo celular

Laboratorio de cultivo celular

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Cultivo primario y líneas celulares

Curso: Biología y Genética Molecular Johany Cecilia Sánchez Guillen

CD: 9518 jsanchezg@ucsm.edu.pe

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