Cuales Metodos Pueden Ser Empleados Para La Deteccion De Mycobacterium Tuberculosis Multirresistente (MDR-TB)?

Cuales metodos pueden ser empleados para la deteccion de Mycobacterium tuberculosis multirresistente (MDR-TB)?

Mycobacterium tuberculosis es un microorganismo no esporulado, inmóvil, de forma bacilar o cocoide, estrictamente aerobio, no capsulado, acido-alcohol-resistente, causante de la tuberculosis pulmonar; en la actualidad dicho microorganismo ha sido ampliamente estudiado ya que ha generado resistencia a diversidad de fármacos, (entre estos están la rifampicina, izoniacida, etambutol, estreptomicina, ofloxacina y amikacina) lo cual ha creado un problema de salud publica a nivel global; por ello, se han llevado a cabo varios estudios para su rápida detección, entre ellos mencionamos: Tecnicas de PCR y PIROSECUENCIACION.

El ensayo de pirosecuenciacion recientemente establecido es un método rapid y de alto rendimiento, ya que permite la determinación de secuencias de ADN a gran escala, aplicable a genomas completos, sin necesidad de utilizar primers y nucleótidos marcados, además de ser un método con alto índice de sensibilidad y especificidad. La pirosecuenciacion se fundamenta en la detección de pirofosfato liberado durante la síntesis de ADN y consiste en la unión de hebras únicas de ADN a una esfera por medio de un adaptador, tras lo cual son sometidas a clonación in vivo; luego de que esta esfera se carga, se adicionan las enzimas (DNA POLIMERASA, SULFURILAZA, ATP LUCIFERASA y APIRASA) y sus respectivos sustratos (APS y LUCIFERIN); a continuación se agrega una solución de reacción, es decir un dNTP (nucletidos fosfatados), con lo cual se da el proceso de replicación.

Es asi como por medio de este método, se realizo una detección simultanea de los genes que han mutado en el Mycobacterium tuberculosis y por lo tanto son los responsables de la característica de multiple resistencia a diversos fármacos de este microorganismo, demostrándose que la resistencia al antimicrobiano rifampicina esta casi totalmente asociada con la mutacion de una región de 81 pares de bases del gen rpoB e igualmente la resistencia a otros antimicrobianos (isoniazida, etambutol, estreptomicina, ofloxacina y amikacina) se encuentra principalmente en mutaciones de los genes katG, embB, rpsl, gyrA y RRS, respectivamente.

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