DETERMINACION DE LA LONGITUD DE ONDA DOMINANTE EN ESPECTROFOTOMETRIA

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DETERMINACION DE LA LONGITUD DE ONDA DOMINANTE EN ESPECTROFOTOMETRIA

I OBJETIVOS

Conocer el procedimiento de la determinación de la longitud de onda dominante en alimentos líquidos transparentes tales como jugos y extractos vegetales.

II. FUNDAMENTO

La radiación al incidir sobre una muestra liquida produce el efecto de absorción de esta energía por los solutos que se encuentran en la muestra. Esta absorción es máxima a una determinada longitud de onda a la que se le conoce con el nombre longitud de onda determinante.

Los componentes que se encuentren en los alimentos líquidos tienen diferentes estructuras químicas, y cada uno de ellas absorbe diferentes cantidades  de energía radiante a diferentes longitudes de onda. De ahí que sea necesario utilizar todas las longitudes de onda dentro del rango de luz visible para encontrar la longitud de onda dominante de cada muestra.

ESPECTROFOTOMETRIA

La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo.

La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química.

Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.

El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida.

III. MATERIALES Y METODOS

1. MATERIALES

• Muestras: 20ml de jugos y extractos vegetales (muestras) naranja, limón, espinaca, piña, sandia, tomate.
• Espectrofotómetro
• Agua destilada
• Papel secante
• Vasos de 50 ml

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1. PROCEDIMIENTO

2.1) Preparación de la muestra

 Se compraron las frutas y vegetales que serán  utilizados en las pruebas. Se lavan y pican y luego se someten aun estrujados o a un licuado manual o aparatos adecuados. Posteriormente deben ser colados quedándonos sola y únicamente con la parte liquida de los productos los cuales se someterán al espectrofotómetro.

2.2) Determinación de la longitud de onda dominante

1.-  Conectar el espectrofotómetro media hora antes de la prueba.

2.- En una cubeta colocar agua destilada e introducir la cubeta dentro del espectrofotómetro. Leer el % de transmitancia a 400nm si el resultado es 100% transmitancia continuar con la prueba.

3.-  Colocar la muestra en una segunda cubeta y remplazar la cubeta con agua dentro del espectrofotómetro y leer la absorbancia y anotar.

4.- Repetir el procedimiento anterior cambiando su longitud de onda determinante a 420nm, 440nm, hasta alcanzar los 700nm.

2.3) Manejo de datos

1. Construir la gráfica Absorbancia vs.  Longitud de onda correspondiente a cada muestra.

2. En cada una de las curvas obtenidas encontrar la longitud de onda correspondiente a la máxima absorción.

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IV RESULTADOS Y DISCUSIONES

CUADRO Nº 1: VALORES OBTENIDOS EN EL ESPECTOFOTOMRTRO

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