DETERMINACIÓN DE HEPATITIS

DETERMINACIÓN DE HEPATITIS

La membrana se encuentra precubierta de HBsAb, lo que hará el plasma junto con el suero será reaccionar con esta partícula. Mediante acción capilar, la mezcla pasará a la membrana cromatográfica para reaccionar y generar una línea de color.

PROCEDIMIENTO

Se toma la muestra de suero en un tubo de tapa amarilla.

1. Retirar el empaque y utilizar lo antes posible.
2. Ubicar el dispositivo de prueba en una superficie limpia y nivelada. Mantener el gotero verticalmente y trasferir 3 gotas completas de suero.
3. Esperar a que aparezca la línea roja (s). Los resultados deben ser leídos a los 15 minutos.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS.

• Positivo: aparecen dos líneas rojas. Una línea debe de estar en la región control (C) y otra línea debe estar en la región de prueba (T).
• Negativo: una línea roja en la región control (C)
• Inválida: falla en la presencia de la línea control.

HEPATITIS B (HBsAg)

Se necesita poner en contacto a la muestra con un anticuerpo monoclonal anti-HBs. De ser que la misma contenga antígeno HBsAg se forma un complejo con los anticuerpos y permanece unida al soporte. La prueba pasa por procesos de lavado, en donde la fracción no unida se elimina luego de agregar otro anticuerpo monoclonal conjugado con peroxidasa.

PROCEDIMIENTO

Obtener la muestra de manera usual (suero)

1. Procesar simultáneamente 2 Controles Positivos (dilución de suero inactivo, reactivo para HBsAg), 3 Controles Negativos (dilución de suero inactivado, no reactivo) y los Desconocidos
2. Para evitar la evaporación, cubrir la placa con una cinta autoadhesiva e incubar en estufa 60 minutos a 37º C.
3. Aspirar cuidadosamente el líquido de cada pocillo recibiéndolo en un recipiente para desechos biológicos que contenga 5% de hipoclorito sódico.
4. Lavar 5 veces con Buffer de Lavado empleando aproximadamente 350 ul/vez/pocillo (después de cada lavado, el líquido se descartará también en el recipiente con hipoclorito)
5. Al finalizar el último lavado, eliminar por completo el líquido residual.
6. Agregar a cada pocillo 100ul de conjugado y luego mezclar suavemente durante 10 seg.
7. Al finalizar el último lavado, eliminar por completo el líquido residual y posteriormente agrega una gota de revelador A y otra de revelador B a cada pocillo
8. Incubar 30 minutos a temperatura ambiente y luego agregar una gota de Stropper a cada pocillo

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

• No reactiva toda muestra que no presente una coloración mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario, una muestra netamente amarilla se considera reactiva. Colores tenues mayores que el del Control Negativo, requieren la interpretación instrumental.

PRUEBA DE VIH

La prueba contiene una membrana en forma de tira la cual está recubierta con antígenos recombinantes de VIH 1 y VIH 2. Si la muestra contiene anticuerpos Anti-VIH 1 y Anti-VIH 2, estos anticuerpos formarán un complejo con el conjugado colorido, y posteriormente aparecerá una línea visible en cada región de prueba.

PROCEDIMIENTO

1. Colocar muestra en el pocillo S (suero o plasma), sólo se dispensará 20μL de muestra.
2. Agregar 2 gotas de diluyente en el pocillo donde anteriormente colocamos nuestra muestra.
3. Comienza la reacción y se apreciará un color rojizo-púrpura corriendo a través de la membrana de la prueba.
4. Interpretar resultados luego de 10 a 30 minutos de agregar el diluyente al pocillo S.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

• Resultado REACTIVO

- Reactivo para VIH Tipo 1: La banda de prueba aparecerá en la membrana a la altura del número 1 + presencia de la banda control.

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