DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES, ALBÚMINA Y GLOBULINA

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES, ALBÚMINA Y GLOBULINA - Informe de laboratorio #5 Bioquímica II

miércoles, 18 de julio de 2012

Informe de laboratorio #5

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES, ALBÚMINA Y GLOBULINA

PROTEÍNAS

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc.

La proteína más abundante en plasma es la albúmina. Una de sus funciones más importantes es la de permitir el transporte de ácidos grasos, hormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son insolubles en medio acuoso.

La concentración de albúmina en plasma influye notablemente en el mantenimiento de la presión coloidosmótica, lo que estaría relacionado con su relativamente bajo peso molecular y su gran carga neta.

En condiciones patológicas como pérdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de diversos orígenes, se observan hiperproteinemias.

En general, ambas situaciones se ven acompañadas también por hipoalbuminemias. Los aumentos anormales de albúmina son ocasionales y se relacionan casi siempre con deshidratación que produce el consecuente aumento en el contenido proteico del plasma.

Fuente: Mundo Bioanálisis 2010

http://www.mundobioanalisis.com/fabricante/wiener/electrolitos/descarga/1690004.pdf

Materiales

• Muestra de sangre

• Tubo tapa lila

• Reactivos: Biuret y Albúmina

• Cubetas

• Micropipetas

• Centrífuga

• Espectrofotómetro

• Reloj

Procedimiento

1. Extraer una muestra de sangre del paciente con el tubo lila. Centrifugarlo por 10 minutos.

2. En tres tubos de ensayo, marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido) colocar:

Proteínas Totales / Biuret

B

S

D

Estándar

50 ul

Suero/Plasma

50 ul

Reactivo EDTA/Cu

3,5 ml

3,5 ml

3,5 ml

3. El reactivo de viuret tiene que ser llevado a la incubadora a 37ºC por 10 minutos.

4. Colocar en otros tres tubos más:

Albúmina

B

S

D

Estándar

10 ul

Suero/Plasma

10 ul

Reactivo

3,5 ml

3,5 ml

3,5 ml

5. Medir la absorbancia de los tres tubos en 540nm el de Biuret y 625nm

...