Determinación de ácido úrico

INTEGRANTES:

ADRIANA SANCHEZ

MÓDULO /CICLO:

III

¨A¨

ASIGNATURA:

BIOQUIMICA

NRO. DE PRÁCTICA:

9

DOCENTE:

LIC. MARIA DEL CISNE LUZURIAGA

NRO. DE GRUPO:

1

TÌTULO DE LA PRÀCTICA:

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO.

FECHA:

24 DE ENERO DE 2019

NOTA:

OBJETIVOS:  

• Conocer la importancia que tiene realizar la determinación de creatinina en suero sanguíneo.

• Reconocer los valores referenciales de urea tanto en adultos como en niños.

MATERIALES

INSUMOS

• Tubos de ensayo
• Pipetas automáticas
• Pipetas Volumétricas
• Gradilla
• Pera de goma
• Puntas azules de 1000 uL
• Puntas blancas o amarillas de 10 a 200 uL

• Lápiz graso
• Guantes
• Alcohol
• Algodón
• Torniquete
• Jabón líquido
• Detergente
• Cloro

REACTIVOS

MATERIAL BIOLÓGICO

• Kit de reactivos para determinar Acido urico

• Suero y/o plasma sanguíneo

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS

• Espectrofotómetro

• Baño maría
• Cronómetro
• Esterilizador
• Centrífuga

FUNDAMENTO TEÓRICO

Ácido úrico, es un compuesto nitrogenado, blanco, inodoro e insípido, de fórmula C3H4N4O3, que se forma en el cuerpo como resultado del metabolismo de las proteínas es el mayor producto del catabolismo de los nucleósidos purínicos (adenosina y guanosina) originarios de la vía metabólica de las purinas. Estas pueden sintetizarse endógenamente por descomposición de los ácidos nucleídos o incorporarse externamente a través de dietas en que los ácidos nucleídos estén presentes.

TÉCNICAS Y PROCEDIMIENTOS PARA EJECUTAR LA  PRÁCTICA:

METODO:

PROCEDIMIENTO:

El siguiente procedimiento se basa en el método enzimático colorimétrico:

1. Aplicar normas de bioseguridad.
2. Asegurarse del cumplimiento de los protocolos de mantenimiento de los equipos.
3. Cumplir con los programas y protocolos de control de calidad establecidos para la determinación de los analitos en la presente guía de prácticas.
4. Leer el inserto del kit de Reactivo para determinar ácido úrico y realizar el pipeteo basándose en el mismo.
5. Rotular tres tubos de ensayo con blanco, estándar y muestra respectivamente.
6. En el tubo de blanco añadir 10 ul de agua destilada, en el tubo de estándar colocar la cantidad 10 ul de estándar indicada en el inserto y, en el tubo de muestra colocamos la cantidad de 10 ul de suero o plasma respectiva de acuerdo al inserto.
7. Seguidamente en los tres tubos procedemos a colocar 1000 ul la cantidad de reactivo de ácido úrico, teniendo como referencia el inserto del kit de reactivo para determinar glucosa.
8. Mezclar e incubar por 10 min a temperatura ambiente el tiempo y temperatura indicada por él inserto.
9. Leemos las absorbancias en el Espectrofotómetro a un filtro de 505 nm.
10. Para el cálculo de resultados, aplicar la siguiente fórmula.

[pic 2]

Nota: Para ejecutar la determinación de ácido úrico nos guiaremos en el principio de la técnica que se la obtiene del kit del reactivo, la cual nos indica las cantidades que debemos colocar en la muestra, estándar y reactivo.

CALCULO DE LA CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA CON ESTANDAR:

 [pic 3]

RESULTADOS:

Luego del respectivo procedimiento, tenemos los siguientes resultados y absorbancias:

Calculo de resultados:

C= 6 x     [mg/dl][pic 4]

C= 6 x     [mg/dl][pic 5]

C= 5.22 mg/dl

El valor analizado y calculado de la concentración de creatinina en suero determina una concentración normal dentro del rango de referencia del inserto de Kit de reactivos de Acido Urico

Aunque existe factores que pueden influir en los resultados, tales como: la temperatura, calidad de los reactivos, pipeteo, calibración de equipos, etc.

CONCLUSIONES:

• En esta práctica se realizó la determinación de ácido úrico, es muy importante para el diagnóstico de enfermedades como hiperuricemia (elevación de ácido úrico en sangre) y gota es muy importante mantener el nivel de ácido úrico, ya que estas enfermedades son muy molestas. Un rango normal es de 2,5 a 6 para mujeres, hombre de 7,2, el resultado que nos dio fue de 5.22mg/dl quiere decir que se encuentra en un rango normal.

RECOMENDACIONES:

• Verifica que el Kit de reactivos este de temperatura adecuada, es decir que no esté congelada.
• Tener en cuenta siempre el tiempo de lectura.
• No reutilizar las puntas de pipetas en muestras con reactivo.

PREGUNTAS DE CONTROL:

• ¿Cuál es el metabolismo del Acido Úrico (esquema)?

[pic 6]

• ¿Cuáles son los valores de referencia del Acido Úrico?

Un rango normal es de 2,5 a 6 para mujeres, hombre de 7,2,

• ¿Indique las cinco principales patologías por alteraciones del Acido Úrico?

• Enfermedad de gota, producida por la deposición del exceso de ácido úrico en las articulaciones, lo que produce un dolor parecido al de una quemadura.
• Cálculos en los riñones.
• Nefrolitiasis
• Nefropatía crónica o aguda.

• Interprete los resultados obtenidos

Un rango normal es de 2,5 a 6 para mujeres, hombre de 7,2, el resultado que nos dio fue de 5.22mg/dl quiere decir que se encuentra en un rango normal.

• ¿Indique dos posibles causas por las que se puede afectar el análisis?

La obesidad

El exceso de bebidas alcohólicas.

BIBLIOGRAFÍA:

Parrales, H. (2017). Creatinina. Obtenido de https:

//cerebromedico.com/que-es-la-creatinina/

MedlinePlus. (2015). Obtenido de MedlinePlus: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003475.htm

Perez, O. (2016). Creatinina. Obtenido de https:

              //www.creatinina.org/

ANEXOS:

[pic 7][pic 8]

[pic 9][pic 10]

[pic 11][pic 12]

[pic 13][pic 14][pic 15]

[pic 16]

FIRMA DEL ESTUDIANTE

                      FIRMA DEL DOCENTE

ADRIANA SANCHEZ                  …………………………….

CI.-………………………..

           ………………………………………

LIC. MARIA DEL CISNE LUZURIAGA