Determinación Del Tiempo Y Punto Térmico Mortal En Microorganismos

Tema

TINCIÓN DE GRAM - TINCION DIFERENCIAL.

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Observación De Bacterias

Tinción De Gram- Tinción Diferencial

Sembrado En Placa De Microorganismos Del Medio Ambiente

Aislamiento De 2 Microorganismos Y Obtención De Un Cultivo Axenico

Aislamiento De Bacterias Mediante El Metodo Siembra En Placa Por Estrías

ELABORACIÓN DE UN ANTIBIOGRAMA

DETERMINACIÓN DEL TIEMPO Y PUNTO TÉRMICO MORTAL EN MICROORGANISMOS

Introducción

La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción

diferencial empleado en Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color moradas y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella. Microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.

El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las

células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales están presente para solubilizar el yodo, y actúan de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta.

La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar

la decoloración, ya que en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos sí lo hacen.

Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza

una coloración de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules.

La safranina puede o no utilizarse, no es crucial para la técnica. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. Al término del protocolo, las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas, se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó, por ejemplo, safranina).

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