Determinación de la concentración de glucosa

CONTENIDO DE LA GUÍA PRÁCTICA 

1. N° DE LA PRÁCTICA: 9

1. UNIDAD CURRICULAR DE LA SIGNATURA: UNIDAD III

1. TÍTULO: GLUCOSA
2. OBJETIVOS: Determinación de la concentración de glucosa por un método enzimático colorimétrico
3. FUNDAMENTO Y MÉTODO DE LA PRÁCTICA: 

5.1. Introducción

La glucosa, es la principal fuente de energía del organismo, que se transforma en glucógeno y se almacena en el hígado o se transforma en ácidos grasos y se almacena en los tejidos adiposos. Varias hormonas, además de la presencia de insulina y glucagón regulan la cantidad de glucosa en el torrente sanguíneo. La concentración de glucosa en la sangre se utiliza para diagnosticar trastornos metabólicos como diabetes, glicemia neonatal y enfermedades del páncreas. La hiperglicemia, síntoma asociado con un elevado nivel de glucosa en la sangre, está ligada a la diabetes mellitus de tipo I (insulinodependiente) y de tipo II (no insulinodependiente) (MEDICA, 2021).

5.2. Fundamento

En la reacción de Trinder1,2, la glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa (GOD), con formación de peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa (POD), el fenol y la 4- aminoantipirina (4-AA) se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina roja proporcional a la concentración de glucosa en la muestra (Linear Chemicals, 2019).

1. PARTE EXPERIMENTAL: 

1.  Equipos, Materiales y reactivos 

1.  Procedimiento: 

• Ingresar al laboratorio virtual en el siguiente enlace: http://biomodel.uah.es/lab/abs/ensayo.htm 
• Dirigirse a la pestaña denominada Glucosa
• Conecta el espectrofotómetro y ajusta la longitud de onda a 505 nm.
• Empleando las micropipetas de volumen variable P200 y P1000, prepara en los tubos de ensayo las mezclas descritas en la tabla 1.
• Cuando estén todos completos, añade 1 mℓ del reactivo cromógeno a cada uno de los tubos y espera para que se desarrolle la reacción (15 min virtuales).
• Usa la pipeta Pasteur para transferir el contenido del tubo nº 0 a la cubeta de espectrofotómetro. Mete la cubeta al especrofotómetro y pulsa el botón “A=0”. Saca la cubeta y vacíala.
• Transfiere con la pipeta Pasteur el contenido del tubo nº 1 a la cubeta, mete ésta al espectrofotómetro y anota el valor de absorbancia en tu cuaderno de laboratorio. Puedes pulsar el botón [pic 1] para registrar la lectura de absorbancia en la pantalla inferior.
• Repite el procedimiento para el resto de tubos.
• Construye una tabla con la concentración de glucosa en la mezcla de cada tubo (tubos 0 a 5) y el respectivo valor de absorbancia. Puedes pulsar el botón [pic 2] para copiar el listado de valores de absorbancia.

Tabla 1. Guía de Disoluciones

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