Determinación de la constante de Michaelis – Menten y la Velocidad máxima.

Practica # 4

TIROSINASA II: Determinación de la constante de Michaelis – Menten y la Velocidad máxima.

Introducción

Las enzimas funcionan como catalizadores biológicos. Por lo general aumentan la rapidez para formar nuevos productos. Cuando las condiciones del medio son óptimas, es decir, la reacción entre el sustrato y la enzima se encuentra a temperatura y pH favorables, la rapidez dependerá de la relación entre concentraciones de sustrato y enzima. En la cinética enzimática hay dos datos de gran interés que facilitan el estudio de la actividad de las enzimas como la constante de Michaelis-Menten y la velocidad máxima de reacción, estos datos  se pueden encontrar experimentalmente realizando reacciones entre sustrato y enzima variando especialmente la cantidad o concentración del sustrato.

Objetivos:

• Identificar las concentraciones adecuadas para las cuales la enzima tirosinasa alcanza su tope de velocidad máxima.

• Analizar el comportamiento de una catálisis enzimática cuando se toma como variable la cantidad de sustrato a reaccionar.
• Explicar la función o el papel que desempeña una enzima en una reacción bioquímica.

Calculo y resultados: 

[pic 1]

Grafico 1: absorbancian en funcion del tiempo

Para obtener la concentración final de sustrato aplicamos la siguiente formula

[pic 2]

Donde:

 𝑺 𝒇:𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜

 𝑺 𝒊:𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 

𝑽𝒊:𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑎𝑑𝑖𝑐𝑖𝑜𝑛𝑎𝑑𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 0.5:3.0 𝑚𝐿

 𝑽𝒇:𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝐹𝑖𝑛𝑎𝑙 (5 𝑚𝐿)

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Tabla 1: resultados

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