Efecto de la Temperatura Sobre la Actividad del Inhibidor de Tripsina

Cuestionario 6. Efecto de la Temperatura Sobre la Actividad del Inhibidor de Tripsina

 Acosta Farías, Paula       Díaz Salazar, Josselyn   Guija Rodríguez, Perla

1. Con la muestra 1g de harina de soya, utilizada en el cuestionario 5, se procedió a hacer una prueba sobre el efecto del calentamiento sobre el inhibidor de tripsina. Por lo tanto, los resultados para la AIT de la muestra pueden ser utilizados del cuestionario 5. Con esa muestra extraída tal como se describe en el cuestionario 5 se procedió a realizar una medida de actividad del inhibidor de tripisina, calentando previamente para determinar el efecto de la temperatura sobre el inhibidor de tripsina.

1. La muestra previamente diluida (0.25/25) de extracción del inhibidor de la soya, se sometió a un calentamiento por 3 minutos a 80°C, previo al análisis enzimático. Se realizó luego la medida de actividad del inhibidor de tripsina bajo el mismo formato que en el cuestionario 5. Se obtuvo una absorbancia de 0.393 para la muestra y 0.003 para el blanco muestra. Determine la AIT e interprete los resultados obtenidos, comparando estos con los obtenidos en la pregunta 1 parte a del cuestionario 5.

• Abs. st. Prom

Abs.Bst = 0.02

Abs.st = 0.48

Abs. Rst = 0.46

Abs. st. Prom = 0.45 (absorbancia está 0.42 + 0.05)

Para el st: 

• Coeficiente de variación

D.E = [pic 1]         C.V = DE/u

D.E: desviación estándar

C.V: coeficiente de variación

u = Abs. st. Prom = 0.45

Ix1-uI^2= 0.46 – 0.45 = 1 x 10 ^-4

Ix2-uI^2= 0.44 - 0.45 = 1 x 10 ^-4

Sumas de Ix1-uI^2= 2 x 10 ^-4

N - 1= 1

→ D.E = 0.01414

→ C.V = (0.01414) / 0.45 = 0.031427

C.V%= 3.1427 % (menor que 5%)

• Abs. M1. Prom para 80ºC

Abs.BM1 = 0.003

Abs.M1 y RM1 Prom = 0.393

Abs. M1(80ºC). Prom = 0.393 – 0.003 = 0.39

• Actividad de tripsina UT

Unidades de tripsina de st

1 UT ----- 0.01

X       ----- 0.45

X = 45 UT (en el tubo)

Unidades de tripsina de M1(80ºC)

1 UT ----- 0.01

X       ----- 0.39

X = 39 UT (en el tubo)

• Grado de inhibición

45 UT    ----- 100%

39 UT ----- Y

Y= 86.67 % (porcentaje de tripsina que quedó en el tubo)

Grado de Inhibición: 100% - 86.67% = 13.33% (en el tubo) (30 - 70%, para que sea confiable los resultados)

• Actividad del inhibidor

UTI = 45 – 39 = 6 UTI (en el tubo)

Gramos de harina

1g ----- 100ml

Z   ----- 0.25ml (se sacó de los 100ml)

Z = 0.0025 g

        2,5 mg ------ 25ml (donde se diluyó)

        W     ------ 1 ml

W = 0.1 mg 

6 UTI ----- 0.1 mg (harina)

       X ----- 1mg

       X = 60 UTI/mg de harina

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