Espectro de absorción de una solución colorida

1. ¿Cómo se determina el espectro de absorción de una solución colorida?

El espectro de absorción es una representación gráfica que indica cantidad de luz absorbida (ε) a diferentes valores de λ.

A partir de una solución diluida de un compuesto, cuya absorbancia máxima entra dentro del rango de medida del espectrofotómetro, se verá el valor de absorbancia a diferentes longitudes deonda frente a un blanco que contenga el disolvente de la solución de la muestra a caracterizar. A partir del espectro de absorción se obtendrá el valor de λ al que el compuesto presenta la mayor absorbancia (λmax). Dicho λ se utilizará a la hora de hacer determinaciones cualitativas y cuantitativas del compuesto.

El espectro de absorción de un cromóforo depende, fundamentalmente, de la estructura química de la molécula. No obstante, hay una gran cantidad de factores que originan variaciones en los valores de λmax y εM, entre los que se incluye el pH, la polaridad del solvente o moléculas vecinas y la orientación de los cromóforos vecinos; y cada uno afecta de forma particular. Por ejemplo, variaciones originadas por cambios de pH son debidas al efecto de éste sobre la ionización del compuesto. A continuación se muestran como ejemplo los espectros de absorción de HNTS (un reactivo empleado para la determinación de especies oxidantes) y comprobándose que por espectrotometría se puede seguir el efecto que ejercen el pH y los oxidantes.

Existen dos métodos fotométricos generales:

La fotometría directa: Es el método más general. Se mide la absorbancia de la especie a determinar. Cuando la sustancia es colorida o el producto de su reacción no presenta color, la absorbancia es proporcional a la concentración de la sustancia.

La fotometría indirecta: si la sustancia a determinar origina la desaparición del color, esto se puede aprovechar con fines cuantitativos. La disminución de absorbancia es proporcional a la concentración de la sustancia a determinar.

2. ¿Cómo se selecciona la longitud de onda apropiada en un espectro para la aplicación en la determinación de concentraciones por espectrofotometría?

La radiación que incide sobre la muestra absorbente debe de ser lo más monocromática posible, es decir, debe tener sólo un pequeño rango de longitudes de onda, porque:

Cuanto más monocromática sea la radiación, mejor se cumplirá la ley de Beer.

3. ¿Qué establece la ley de Lamber-beer-bourger?

Ley de Lambert y Beer

Establece que la absorbancia es proporcional al número de moléculas absorbentes

por las que pasa la luz.

A = ε•c•l

A = absrobancia

c= concentración

l=longitud de la celda

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