Esterilizacion Por Calor

Para poder desempeñar correctamente las tareas en un laboratorio de microbiología, es indispensable contar con conocimientos teóricos acerca de los diferentes métodos de control del crecimiento microbiano (métodos de esterilización, desinfección, apepsia, etc.).

1.1 CONCEPTOS

Por control del crecimientos microbiano, se entiende tanto la inhibición del “crecimiento” microbiano (evitar su multiplicación) como la destrucción de aquellos.

a) Esterilización. Es el proceso de destrucción o eliminación completa de toda forma de vida existente en el interior o en la superficie de cualquier material, por medio del calor, radiaciones, filtración, etc. Por lo tanto, la esterilización es un término absoluto e incluye la destrucción de las esporas y formas vegetativas, los virus, etc.

b) Desinfección. Es un proceso en el que se destruyen las formas vegetativas de los microorganismos más comunes pero no las esporas. Generalmente los desinfectantes son productos químicos excesivamente tóxicos para ser usados directamente sobre tejidos vivos. Muy pocos desinfectantes llegan a esterilizar.

c) Antisepsia. Es un proceso en el que se destruyen las formas vegetativas de los microorganismos patógenos más comunes, pero no necesariamente esporas, presentes sobre el cuerpo, la piel, las mucosas, los tejidos vivos, etc. El agente empleado se denomina antiséptico.

d) Asepsia. Se refiere a la condición de ausencia de microorganismos de un objeto o área. Por ejemplo, las técnicas asépticas son las que evitan la contaminación propia de otros o de los materiales durante el trabajo.

e) Microbiostasis. Es una condición por la que el crecimiento o la multiplicación de los microorganismos están inhibidos, lo que no quiere decir que sean destruidos. Si el agente microbiostático es eliminado, el crecimiento microbiano puede resurgir. De igual definición pero de aplicación a la correspondiente categoría de microorganismos son los fungistáticos y los bacteriostáticos

a) Microbiocida. Es el agente que destruye las formas viables de los microorganismos. De igual significado pero con ámbito más restringido son los términos fungicida y bactericida.

1.2 AGENTE FÍSICO: EL CALOR

El calor es uno de los agentes físicos más usados. Su acción depende de la temperatura alcanzada y del tiempo de aplicación. De la consideración de éstos dos aspectos surgen las siguientes expresiones:

• Punto térmico mortal: Es la menor temperatura capaz de matar una suspensión bacteriana en 10 minutos (tiempo constante y temperatura variable).

• Tiempo térmico mortal: es el menor tiempo necesario para matar una suspensión bacteriana a una temperatura determinada (tiempo variable y temperatura constante). Para medir el efecto del calor se debe tener en cuenta si se trata de formas vegetativas o esporuladas (de resistencia).

Para eliminar las formas vegetativas no se requiere de temperaturas muy altas ya que la mayoría se destruye a los 50 y 70°C, especialmente las patógenas. Las bacterias esporuladas requieren de temperatura superiores a los 100°C.

Además de la temperatura y el tiempo de exposición es importante tener en cuenta la humedad, el pH y la naturaleza del material a esterilizar. La humedad hace más efectivo el poder de penetración del calor; en cuanto al pH, el agregado de ciertas sales alcalinas aumenta la temperatura de ebullición.

Fundamento de la esterilización por calor: El calor actúa desnaturalizando (coagulando) las proteínas. En las formas esporuladas (de resistencia), esta acción se ve disminuida por la presencia de lípidos formando parte de su estructura química, que actúa protegiendo las uniones peptídicas de las proteínas.

c) Aire caliente (ej. Horno Pasteur): Se emplean las estufas de calor seco en las que el aire caliente circula por el espacio que existe entre la doble pared, transmitiendo así el calor a los objetos que se encuentran en su interior. Los microorganismos se mueren por oxidación de sus estructuras previa deshidratación, pudiéndose llegar a una ligera carbonización.

Tiempo requerido: Una hora y media a dos horas, a una temperatura de 160 a 180ºC. El tiempo se mide desde el momento en que se alcanzó la temperatura indicada y está condicionado por la cantidad de material y su distribución dentro de la estufa. El aire caliente no tiene mucho poder de penetración, por esta razón es que se requiere mayor temperatura y tiempo que con otros métodos.

Aplicación: se utiliza preferentemente para esterilizar material de vidrio. Recordar que todo el material debe ir perfectamente acondicionado, preferentemente envuelto en papel blanco de modo tal que una vez retirado de la estufa, permanezca estéril hasta el momento de ser usado.

Descripción de la estufa: La estufa de esterilización a seco es una caja metálica de paredes triples. La pared interior es generalmente de acero inoxidable y presenta orificios para la libre circulación del aire caliente. La pared intermedia encierra, junto con la externa, el material aislante, que puede ser lana de vidrio o amianto. La fuente de calor es una resistencia eléctrica aunque también existen estufas a gas. Viene provista de un termorregulador para graduar la temperatura deseada. En la cara superior de la estufa existen orificios para permitir la salida de gases y vapores, pudiendo existir otro para la colocación de un termómetro en caso de no traerlo incorporado.

En el interior posee rejillas metálicas de altura graduable para acondicionar sobre ellas el material a esterilizar.

Uso: esterilización de material de vidrio y otros materiales termorresistentes que interese mantenerlos secos. Todo el material a esterilizar debe estar debidamente empaquetado con papel de estraza o contenido dentro de cajas metálicas.

1.3 CALOR HUMEDO

El vapor de agua es uno de los métodos más eficaces para destruir microorganismos y, a igualdad de temperatura, es mucho más eficaz que el calor seco (aire). Hay varias formas de emplear el calor húmedo.

a) Agua a ebullición: Se colocan los objetos en el agua y se lleva a ebullición durante un tiempo no menor de quince minutos. Se utiliza para jeringas, agujas, ampollas, etc. Precaución: Los gérmenes esporuladas y ciertos virus no mueren con 15 minutos de ebullición.

c)

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