Extracción de ADN. Laboratorio 111, Departamento de biología celular,

Extracción de ADN

Helen Mabel Martínez, Adalberto Rodríguez & Carlos Serna.

Laboratorio 111, Departamento de biología celular, Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y Tecnología, Universidad de Panamá. Email: helenmabel17@gmail.com adalbertorod1998@gmail.com mario.1212@gmail.com 

Introducción

Además del agua, los carbohidratos, las proteínas y los lípidos, los seres vivos están constituidos por otras moléculas que, en menos cantidad, desempeñan funciones muy importantes. Entre estas otras moléculas se encuentra el ADN.

ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Es una molécula formada por dos cadenas de polinucleótidos unidas por puentes de hidrogeno. Constituye el material genético de los organismos, es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados.

La mayoría de los organismos, están formados por millones de células, el ADN está presente en todas las células de estos seres vivos. Sin importar si son organismos multicelulares o unicelulares, procariotas o eucariotas, todas tienen el ADN como vehículo de su código genético. En las células procariotas el ADN se encuentra disperso en el citoplasma. Y por el contrario en las células eucariotas este se encuentra dentro del núcleo, donde está asociado con el ARN y las proteínas.

La investigación sobre el ADN tiene un impacto significativo, especialmente en el ámbito de la medicina. A través de la tecnología del ADN, los científicos pueden modificar microorganismos que llegan a convertir en auténticas fábricas para producir grandes cantidades de sustancias útiles. Los estudios sobre el ADN humano también revelan la existencia de genes asociados con enfermedades específicas como la fibrosis quística y determinados tipos de cáncer. Esta información puede ser valiosa para el diagnóstico preventivo de varios tipos de enfermedades.

A través de esta práctica queremos observar y analizar las funciones que desempeñan los materiales para hacer posible la extracción del ADN a partir de una forma sencilla.

Teniendo en cuenta que el ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse, de ahí la facilidad para retirarla.

Objetivos

• Utilizar unas sencillas técnicas para poder extraer el ADN de un producto natural.

• Obtener una concentración de ADN visible.
• Observar la estructura fibrilar del ADN.

Materiales y Métodos

Se procedió a cortar con una navaja o bisturí  250g de filete de pescado , en pequeños trozos, luego lo colocamos en la licuadora con  aproximadamente 100ml  de agua fría para evitar que el licuado quedara demasiado espeso, finalmente,  la mezcla resultante se filtró, utilizando una gaza y un embudo para eliminar cualquier partícula de gran tamaño  y se introdujo en un coolers con abundante hielo para mantener la muestra en frio. Un proceso similar realizaron mis compañeras con  rebanadas de piña, solo que ha este se le agrego 50ml de agua para hacer el licuado y así extraer el jugo de piña.

Luego de tener dichas muestras en frio, se procedió a realizar la solución jabonosa, agregando 50ml de jabón líquido vel en un vaso químico. El jabón cumple con la función de disolver la membrana celular, que es una bicapa de lípidos. Además de disolver la envoltura o membrana nuclear. Se le agrego también 50ml de agua y 50ml de una solución de NaCI 2M, que cumple con la función de eliminar las proteínas que se unan al ADN. También ayuda a mantener las proteínas disueltas en la fase acuosa de manera que no precipiten. Esto se debe a que la sal estabiliza los grupos fosfatos cargados negativamente y permite que las hebras de ADN se agrupen.

Se procede a mezclar el jabón, agua fría y la solución de NaCI 2M. Para proceder a meter en frio.

Se dejaron las tres mezclas durante unos minutos en frio.

Se procedió a tomar 50ml de la mezcla homogenizada del filete de pescado y se le añadieron 50ml del extracto de jugo de piña, mezclando así ambas soluciones. Luego de esto se le agrego 50ml de solución jabonosa y se mezcló. Esta mezcla final se agregó a un tubo de ensayo de 20ml, que anteriormente se encontraba en frio. Para finalizar se le agrego cuidadosamente, dejando caer por las paredes del tubo de ensayo, evitando mezclar con la mezcla colocada anteriormente, una cantidad suficiente de alcohol etílico que también se encontraba en frio. Esperando así que se crearan dos capas. Observando la culminación de la extracción del ADN en la cual el ADN asciende hasta llegar al alcohol, en lo cual también se observó que las proteínas y las grasas se quedan en la parte acuosa de la mezcla.

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