MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

ÍNDICE

1.- Práctica 1: Reconocimiento de sales minerales--------------------------------------------- 3

2.- Práctica 2: Reconocimiento de carbohidratos de importancia biológica-------------- 5

3.- Práctica 3: Reconocimiento de proteínas de importancia biológica-------------------- 7

4.- Práctica 4: Reconocimiento de enzimas de importancia biológica--------------------- 10

5.- Práctica 5: Reconocimiento de lípidos de importancia biológica----------------------- 12

6.- Práctica 6: Obtención de ácidos nucleicos a partir de levaduras----------------------- 14

7.- Práctica 7: Extracción de ácido desoxirribonucleico a partir de tejido animal----- 17

8.- Práctica 8: Etapas de la mitosis en raíz de cebolla----------------------------------------- 19

9.- Práctica 9: Observación de la membrana celular, el citoplasma y el núcleo en

células de cebolla------------------------------------------------------------------ 21

Práctica 1 Fecha:______/______/______ Calif.______

RECONOCIMIENTO DE SALES MINERALES

OBJETIVO

- Demostrar que en la composición de la materia viva entran a formar parte las sales minerales.

- Conocer el proceso de la coagulación de la leche, como técnica para poder obtener el suero de la leche (fracción líquida) en el que quedan fundamentalmente las sales que pretendemos identificar

INTRODUCCIÓN

Las sales minerales disociadas e aniones (por ejemplo el cl-) y cationes (Na+ y K+) son importantes para mantener la presión osmótica y el equilibrio ácido – base de la célula. La retención de iones produce un aumento en la presión osmótica y por lo tanto la entrada de agua. Algunos de los iones inorgánicos, el magnesio por ejemplo, son indispensables como cofactores enzimáticos. Otros, como el fosfato inorgánico, forman por medio de la fosforilación oxidativa adenosin trifosfato (ATP), principal fuente de la energía química de los procesos vitales celulares. La concentración de los diversos iones varia dentro de la célula y en el líquido que la rodea, así la célula tiene una alta concentración de K+ y Mg++ mientras que el Na+ y el Cl- están localizados principalmente en el líquido intercelular. El anión dominante de las células es el fosfato (PO4=), pero existe también bicarbonato.

CONCEPTOS ANTECEDENTES

Leche

Materia viva

Sales minerales

Suero de leche

Coagulación

Cuajado

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

- Para determinar la presencia de sales es interesante utilizar el suero de la leche, para conseguirlo, podemos realizar esta sencilla receta:

1.- Colocar en un vaso de precipitado de 400 ml, unos 250 ml de leche pasteurizada (de preferencia que sea

leche bronca)

2.- Añadir unas gotas de ácido acético concentrado y esperar unos minutos (aproximadamente entre 10 y 15

minutos)

3.- Al producirse el cuajado filtrar por papel filtro para obtener el suero (se puede utilizar una gasa doblada

en dos partes para mejor filtrado)

4.- Recoger el filtrado en un matraz Erlen Meyer de 250 ml

REALIZACIÓN DE LAS REACCIONES

5.- Preparar una gradilla con tres tubos de ensayo de 16 x 150 sin tapón

6.- Numerar los tubos

7.- En cada tubo de ensayo poner 3 ml de suero de leche

8.- Al tubo de ensayo número 1, añadir 1 ml de solución de Nitrato de plata al 1% en solución acuosa

9.- Al tubo de ensaye número 2, añadir 2 ml de una solución de molibdato de amonio al 1%, tratado con ácido nítrico concentrado suficiente para que el ácido molíbdico que se forma se redisuelva. Calentar el tubo de ensaye a baño maría (lo suficiente para la reacción, tome su tiempo)

10.- Al tubo de ensayo número 3, añada unas 10 gotas de solución de oxalato de amonio al 1%

CUESTIONARIO

1.- ¿ Cuál es función principal de las sales minerales en los organismos vivos?

2.- ¿ Cuál es la parte de la célula en donde se encuentra la mayor concentración de sales minerales?

3.- ¿ Menciona las principales sales minerales para la célula y los organismos vivos? Da su principal función

4.- ¿Por qué se utiliza la leche como modelo para extraer las sales minerales en esta práctica? Explique.

Práctica 2 Fecha:______/______/______ Calif.______

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS DE IMPORTANCIA BIOLÓGICA

OBJETIVO

Identificar los carbohidratos de importancia biológica mediante la hidrólisis del enlace glucosídico en un disacárido y un polisacárido

INTRODUCCIÓN

Los hidratos de carbono, compuestos por carbono, hidrógeno y oxígeno, representan la principal fuente de energía celular y son también constituyentes estructurales importantes de las paredes celulares y de sustancias intercelulares. Los compuestos de carbono se clasifican de acuerdo con el número de monómeros que contienen.

Los monosacáridos son azúcares simples con una fórmula general Cn(H2O)n, se clasifican de acuerdo con el número de átomos de carbono que contienen. Los disacáridos son azúcares formados por la condensación de dos monómeros de hexosa con pérdida de una molécula de agua. Su fórmula es C12H22O11, los más importantes de este grupo son la sacarosa formada por glucosa y fructosa y la lactosa formada por galactosa y glucosa. Los polisacáridos, resultan de la condensación de muchos monómeros de hexosa con la correspondiente pérdida de moléculas de agua. Su fórmula su fórmula es (C4H10O3)n. Después de la hidrólisis dan lugar a moléculas de azúcares simples. Los polisacáridos más importantes en los organismos vivos son el almidón y el glucógeno, que representan sustancias de reserva en células vegetales y animales respectivamente y la celulosa que es el elemento estructural más importante de la pared celular vegetal.

...