Extracción de ADN de un vegetal

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     Extracción de ADN de un vegetal

                                 Cristóbal Cárdenas silva

                                 Sebastián castillo fuentes

                Victoria 4 de mayo de 2016

                     Introducción

El objetivo fue el siguiente: extraer ADN de un tejido vegetal

En el trabajo extraímos el ADN de una célula vegetal (tomate) con los elementos que se no facilitaron en el laboratorio

El ADN es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus, es el responsable de su transmisión hereditaria.

Uno de los métodos para extraer ADN es: Método de salting-out  es uno de los métodos para extraer ADN, en este método se utiliza frecuentemente la proteinasa K, el TRIS-HCl para regular el pH y otros reactivos químicos que aseguren la total inactivación de las enzimas que pueden actuar sobre las moléculas de ADN. Para la extracción se utilizan sales inorgánicas como el perclorato de sodio y el cloruro de sodio en concentraciones muy altas que hacen precipitar a las moléculas orgánicas.

¿Cuál es el propósito de la extracción de ADN?

Comúnmente conocida como "huella genética", la prueba de ADN es una de las herramientas usadas más precisas y controvertidas de identificación. El papel de las pruebas de ADN se ha expandido de la validación histórica de los restos humanos y animales, a determinar los casos en los juzgados familiares y penales.

                   Marco teórico

Formas alternativas de extracción de ADN:

1. Incubación del lisado para su uso
2. Lisis por ruptura mecánica y extracción con disolventes orgánicos
3. Lisado y purificación con un detergente iónico. Método del CTAB
4. Método de salting-out
5. Uso de la proteinasa K y el dodecilsulfato de sodio
6. Método de extracción de ADN con yoduro de sodio como agente caotrópico en un único tubo
7. Uso de resinas de intercambio iónico

Algunas teorías:

1. Robert Feulgen: Que la unidad básica (nucleótido) estaba compuesta de una base pegada a un azúcar y que el fosfato también estaba pegado al azúcar y lamentablemente también concluyó erróneamente que las bases estaban en cantidades iguales y, que un tetranucleótido era la unidad repetitiva de la molécula.

              Métodos

1. En el laboratorio del colegio santa cruz de victoria, mayo de 2016

1. Moler el centro del tomate con un mortero y un poco de sal hasta obtener un sustancia liquida

1. Agregar dos ml de agua destilada a la mescla

1. En un vaso precipitado de 250 ml agregar 50 ml de agua destilada con una pinceta

1. Luego agregar la mezcla del montero en el vaso precipitado que tiene el agua destilada

1. Adherir un poco de detergente liquido en el vaso precipitado y un poco de sal, revolver sin generar espuma.

1. Extraer 10 ml de la mezcla homogenizada en un tubo de ensayo

1. Debe reposar y observar

1. Forma de análisis cualitativo: Es como o se ven los resultados por cualidades o números o gráficos

              Materiales

1. 1 litro de agua destilada.

1. 1 tubo de ensayo

1. 1 vaso precipitados

1. 1 pipeta Pasteur

1. 1 varilla

1. 25 ml. Detergente desengrasante liquido

1. 1 tomate larga vida

1. 5grs de sal de mesa

1. 1 par de guantes

1. 50 ml alcohol 96°

1. 1 delantal

1. 1 cuchillo de mesa

1. 1 mortero de porcelana

1. 1 bolsa hielos en cubos

1. 1 bisturí

1. 1 pinzeta

              Resultado

En este experimento se logró extraer en forma correcta  el ADN del tomate, el cual se pudo apreciar a simple vista, y es el color anaranjado y de forma trenzada.

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