Fuentes de inovación

Objetivos:

• Capacidad para integrar los elementos estructurales de un cromatografo de líquidos, trasladar los conocimientos adquiridos de los parámetros cromatograficos y utilizar el análisis cualitativo y cuantitativo para una muestra real.
• Capacidad para interpretar los resultados obtenidos a partir de parámetros de calidad de mediciones.

Resumen de la investigación teórica:

1. ¿Qué es la cromatografía de líquidos de Alta Eficacia (CLAR o HPLC)?

Es la técnica de separación mas utilizada. Idónea para la separación de especies no volátiles o termolábiles.  

1. Para establecer el método en cromatografía de reparto, ¿cuáles son las distintas propiedades y funciones de la fase móvil en Cromatografía de Gases y en la Cromatografía de Líquidos? Y ¿cómo influyen esas características en los dos métodos (cromatografía de gases y HPLC)?

En la cromatografía de gases la fase móvil no interactúa con las moléculas del analito; su única función es la de transportar el analito a través de la columna. En la cromatografía de líquidos a fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. Influyen en que a diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra debido a su fase móvil.

1. En cromatografía de reparto, cuales son las características de las columnas para:

1. Rellenos de fase normal

La fase estacionaria es polar. (silica gel). La fase móvil es no polar (hexano, isooctano, metileno).

1. Rellenos de fase inversa

La fase estacionaria es no polar (C18, C8, C3, etc.). La fase móvil es polar (agua-metanol).

1. a) ¿Qué es la elución isocrática?

Es la elución con un solo solvente de composición constante.

b) ¿Qué es la elución con gradiente?

En esta elución  se emplean dos  (y algunas veces mas) sistemas de disolvente con distinta polaridad. La proporción de los dos disolventes varía en forma programada; a veces es continua y otras veces se hace por etapas.

1. a) Menciona cinco tipos de detectores para la HPLC.

• Detectores UV, VIS y PDA
• Detector de índice de refracción
• Espectrómetro de Masas
• Detector de Fluorescencia
• Detector de conductividad

1. Explica ¿Cómo funciona el Detector de Absorbancia Ultravioleta?

Utiliza una celda de flujo, porque muchos solutos absorben la luz ultravioleta. Los equipos más simples utilizan una lámpara de mercurio. Utiliza fotodiodos para registrar todo el espectro de cualquier soluto que pasa por el detector. De este modo es posible determinar que compuesto corresponde a cada pico.  

1. Da cinco aplicaciones de la HPLC.

• Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos
• Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos
• Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aditivos.
• Productos de la industria química: Aromáticos condensados, propulsores, colorantes
• Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB

1. 1. Diagrama descriptivo de un Cromatografo de Líquidos de Alta Eficacia.

2. Explica la función de cada una de sus partes

• Controles y procesamiento de datos: estandarizan las operaciones mediante una única interfaz de software que gestiona los conjuntos de datos, los parámetros de los instrumentos, las secuencias, los métodos y los informes.

• Detector: Cualquier propiedad física o química que se pueda medir en la disolución podría usarse como método de detección

           Detectores que miden una propiedad de la fase móvil

           Detectores que miden una propiedad de los solutos

• Fase móvil: Alta pureza (calidad HPLC), tener baja viscosidad, ser compatible con la muestra, debe facilitar la recuperación de la muestra, compatibilidad con el sistema de detección.

• Bomba: Presión estable hasta 5000 psi (400 atm) 1 atm = 14,696 psi, flujo libre de pulsaciones, amplio rango de flujos (0,1 a 10 mL/min).

• Sistemas de inyección: Se emplean válvulas inyectoras de volumen (loop) constante pueden ser manuales o automáticas, Se debe evitar la entrada de burbujas en el sistema de inyección.

• Columna: Al disminuir el tamaño del relleno aumenta la eficiencia pero también la presión de trabajo. Las columnas constan de: cuerpo normalmente de acero inoxidable y relleno – material con i.d. definido.

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