Influencia de la concentración en la actividad de amilasa

Universidad San Francisco de Quito

Laboratorio de Biología para Ingenierías

Informe No.1

Influencia de la concentración en la actividad de la amilasa

Nombres y Apellidos: David Alexander Bravo Jiménez  

Profesor: Carolina Reyes Puig

Código:   00205319                                          

Sección: Lunes

Fecha: 17/09/2018

 Nota: _________/10      

Grupo y horario: (Grupo1) 2:30 pm/3:50

1. Introducción:

La amilasa en una enzima de proteína que proviene de las glándulas salivales ( Pérez Polanco & Montaño Zetina, 2015), esta se encuentra en la saliva de muchos animales incluyendo los seres humanos (tube, -)  y es una catalizadora de la degradación del almidón. Según el tiempo de actividad y el tiempo de actuación esta puede llegar a ser  maltosa o glucosa libre (Unnie, 2014). El almidón se encuentra en mayor abundancia en las plantas es decir que este es un polisacárido de reserva vegetal ( Garrido, 2018).Por otro lado la amilasa es la encargada de la digestión preliminar del almidón. Lo que hace esta es romper las cadenas lineales de almidón y las transforma en azucares simples.

Para ello se necesitó una solución llamada lugol para poder ver la transformación de almidón a maltosa, con este reactivo lo que se logro es que cambie de color la solución a un purpura oscuro.

 Cabe recalcar que las enzimas  como la amilasa se utilizan actualmente para en muchos productos comerciales como el detergente y tiene varios beneficios (Martínez Gallegos, 2005)

Objetivos:

• Se observó la acción de la enzima amilasa sobre los polisacáridos(los almidones) a distintas concentraciones.
• Se comprobó la pre digestión del almidón mediante la ruptura de enlaces glucosídicos usando el colorante lugol.

2. Materiales

• Tubos de ensayo de 15 ml
• 10 tubos de ensayo estándar
• Pipetas Pasteur desechables
• Marcador de vidrio
• Agua destilada
• Gradillas de plástico para tubos de ensayo
• Vaso de precipitación con agua destilada 200ml
• Solución lugol(I2,KI,H20)
• Amilasa salival 10 ml (solución de amilasa 1%)
•  Solución buffer ph:6.8
• Solución de almidon:1%
• Para film “M”
• Solución de amilasa:1%

3. Procedimiento:

Se preparó una solución de amilasa en una probeta (10ml de saliva).Luego se numeró 5 tubos de ensayo, del 1 al 5 usando las pipetas Pasteur desechables se añadió 5 ml de agua destilada en cada tubo. Se realizaron varias disoluciones mezclando bien para q se homogenice. En el primer tubo (primera disolución) se añadió 5ml de amilasa, disolución: 1:1, 0.50% de amilasa. En el segundo tubo (segunda disolución) se añadió  5ml de la primera disolución, disolución: 1:3, 0.25% de amilasa En el tercer tubo (tercera disolución) se añadió 5ml de la segunda disolución: 1:7 ,0.125% de amilasa. En el cuarto tubo (cuarta disolución) se añadió 5ml de la tercera disolución: 1:15, 0.625% de amilasa. En el quinto tubo (quinta disolución) se añadió 5ml de la cuarta disolución: 1:31, 0.3125% de amilasa. Se numeró un segundo set de tubos esta vez de  “A” hasta la  “E”.se comenzó con el tubo 5 del primer set transfiriendo 2ml de su solución en el tubo E del segundo set de igual manera el tubo 4, 3, 2 y 1 se añadió  2ml de cada tubo del primer set a los del segundo set en el respectivo orden. En cada uno de los tubos del segundo set se añadió 40 gotas de buffer (ph6.8) después se mezcló se añadió 1 gota de lugol a cada uno de los tubos del segundo set. Para finalmente empezar con la prueba se añadió 1 ml de solución de almidón al 1% en cada uno de los tubos del segundo set y se mezcló y se tiñeron de purpura, por consiguiente empezamos a datar el tiempo y esperar los resultados.

4. Resultados.

En esta tabla se muestra el tiempo  llevo a los tubos de menor a mayor concentración desde q se tiñeron purpura hasta q regresaron a su normalidad aproximadamente.

En este grafico se aprecia el tiempo q se demoró cada tubo en volver a su color antes de añadir el almidón

[pic 1]

Análisis de resultados:

Tenemos como resultados q a mayor concentración de amilasa  el almidón en la solución es digerido más rápidamente q a menor concentración esto se observa gracias a que hay un aumento de tiempo en función a la concentración de la amilasa en cada tubo de ensayo. Si las soluciones fueran en diferentes proporciones tendríamos resultados muy diferente pero además al trabajar con medidas muy pequeñas y puesto que se hizo una estimación de los tubos q tenían menor concentración, y se demoraron más, si existe un porcentaje de error q se nota claramente en la gráfica y en la tabla puesto q crece linealmente pero no uniformemente

...