Informe sobre Mitosis Fitogenetica MITOSIS EN CELULAS DE CEBOLLA

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Practica N° 1

MITOSIS EN CELULAS DE CEBOLLA

FITOGENETICA[pic 6]

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1. INTRODUCCIÓN:

El proceso por el cual se originan nuevas células a partir de otras ya existentes se llama división celular o reproducción celular. Este es un proceso necesario para: remplazar las células muertas, para colaborar con el crecimiento del organismo del que forman parte y es la base para la reproducción de los organismos a través de la formación de gametos. Cada célula en etapa de división se denomina célula madre, y sus descendientes se llaman células hijas. Se les llama así porque la célula madre transmite copias de su información genética a sus células hijas, posteriormente las células hijas se convertirán en células madres y volverán a pasar la información genética. Estas regiones de crecimiento sirven para estudiar el ciclo celular porque en cualquier momento se pueden encontrar células que están sufriendo mitosis. Todos los seres vivos unicelulares y pluricelulares tienen como misión fundamental la de reproducirse preservando sus características esenciales a través de las generaciones. Los fenómenos que tienen lugar durante la reproducción celular corresponden a una de las etapas del proceso conocido como ciclo celular. Este ciclo resulta de la coordinación de una serie de procesos que involucran la integración de diferentes señales que conducen a la duplicación de DNA, su condensación, segregación y posterior descondensación. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la cual una célula da origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas. Aunque la mitosis, de por sí es un proceso continuo, para su estudio se divide en diferentes etapas consecutivas de acuerdo a los cambios morfológicos que va experimentando la célula y que se continúan con la citocinesis.

Un cariograma de una zona meristematica en plena división mitótica y meiótica nos brinda una clara observación de todas las fases del ciclo celular como son la profase, metafase, anafase y telofase, cada una de ellas está sujeta a procesos independientes como la formación del huso acromático entre otras; también un cariograma nos da a conocer anomalías cromosómicas de lo que estamos estudiando si es que lo tuviese.

1. OBJETIVOS:

• Se Determinará, analizara e interpretara el recuento de fases que ocurren a lo largo de la mitosis en las raíces de la cebolla (células somáticas).
• Se Reconocerá las fases de la mitosis en células somáticas.
• Se Determinará  el coeficiente mitótico en células somáticas.

1. MARCO TEÓRICO:

1. CÉLULA EN INTERFASE:

Presenta un núcleo redondeado con un granulado muy fino y continuo (algunas zonas más intensamente teñidas y otras menos, pero sin discontinuidades). La envoltura nuclear, aunque no se ve, forma un círculo que limita el núcleo.

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Imagen 1 : Interfase

1. CÉLULA EN MITOSIS:

Están en mitosis todas las células en las que se observan cromosomas. El principal problema consiste en identificar en comienzo de la mitosis, que coincide con el de la división celular, y el final de la mitosis que se solapa con la citocinesis.

Comienza la mitosis con el inicio de la espiralización de los cromosomas.

1. Etapas de la mitosis:

• Profase: condensación cromosómica, desaparición de la envuelta nuclear y formación del huso mitótico.
• Prometafase: movimiento de los cromosomas a lo largo del huso mitótico.

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Imagen 2. Profase

• Metafase: los cromosomas se encentran en el plano ecuatorial de la célula, unidos al uso mitótico por los centrómeros.

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Imagen 3. Metafase

• Anafase: división de los centrómeros, de modo que las copias de cada uno de los cromosomas se dirigen a polos opuestos de la célula

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Imagen 4. Anafase

• Telofase: citocinesis, descondensación cromosómica, reaparición de la envuelta nuclear y desaparición del huso mitótico. Formación de dos células hijas. [pic 12]

                                                         Imagen 5. Telofase

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Imagen 6: Ciclo celular mitosis

1. Índice Mitótico

 Se define como la relación entre el número de células por unidad (normalmente 1.000) que sufren mitosis durante un determinado período de tiempo. Y El cociente se utiliza principalmente como estimación de la velocidad del crecimiento tisular. Permite detectar patologías cancerígenas y calcular la capacidad renovadora de un tejido.

1. MATERIALES Y METODOS

1. MATERIAL VEGETAL:

Puntas de raíces de cebolla (Estas se deben previamente haberlos hecho enraizar por lo menos 8 días antes)

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Imagen 7: Raices de la cebolla

1. MATERIALES: [pic 16][pic 17]

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1. REACTIVOS:

• Fijadores: Fijador (Etanol absoluto y ácido acético en una proporción de 3:1)
• Maceración: Ácido clorhídrico 1N (Eliminación de las paredes celulares)
• Tinción: Orceina (Mínimo 24 horas de tinción)

1. PROCEDIMIENTO:

• Se obtiene las puntas de las raíces en crecimiento, para lo cual, con ayuda de una pinza se extrae haciendo pequeños cortes.
• Se coloca las puntas en el fijador preparada previamente con alcohol absoluto y ácido acético. Se coloca en la refrigeradora a 4º C, que no pase de 24 horas. El objetivo en esta etapa es la fijación de los procesos, desplazando el agua de las células y manteniéndolas intactas para el conteo. El etanol fija el citoplasma y el jugo nuclear, mientras que el ácido acético estabiliza las nucleoproteínas.
• El tercer paso es la maceración con el objetivo de eliminar la pared celular, para lo cual las raíces son colocadas en Ácido clorhídrico al 1N por un tiempo entre 4 a 6 minutos a 65º C de Temperatura.
• Se realiza la tinción con Orceina o algún otro colorante con el que tenga afinidad los cromosomas. El tiempo de tinción es como mínimo de 24 horas, si se deja unos días más es conveniente. 5. Se realiza el aplastado o squash para lo cual se coloca puntas de raíz aproximadamente de 0.5 mm.
• Se observa en el microscopio. Nota, luego de cada uno de los pasos es importante enjuagar las raíces con agua destilada, en el caso de la maceración, luego de esta se debe descartar el HCl por lo menos con 3 enjuagues.

1. RESULTADOS

En las células se observaba la división celular, ya que dentro de una pared localizamos dos núcleos, el ADN duplicado para la división, también se observaron ciertos procesos como el de metafase, anafase, telofase y citocinesis.

En un corte fino, tincionado correctamente, se puede observar este proceso ya que por la presencia de pared celular, matriz intracelular y el núcleo, que en las células de raíz es, relativamente grande, se puede observar mejor este proceso.

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