La Composición química de la materia viva III.

Composición química de la materia viva III:

Objetivo
Reconocer la presencia de una biomolécula e distintos materiales de origen biológico.
Conocer un método de identificación selectivo.
Integrar los conocimientos adquiridos en los 2 TP anteriores con el presente.
Destacar la existencia de uniformidad química en la composición de los sistemas vivientes.
Destacar las diferencias entre materiales de origen vegetal y animal.

Materiales
Mortero.
Pipetas de 1, 2 y 10 ml.
Propipetas.
Vasos de precipitado.
Vasos de vidrio.
Embudo.
Tubos de ensayo.
Gradilla.
Papel de filtro.
Pie universal.
Nuez.
Aro metálico.
Cloroformo.
Metanol.
Reactivo de Lieberman: Anhídrido acético 15 ml; ácido sulfúrico 1 ml; cloroformo 24 ml.
Material biológico:
                -    Huevo (yema).
                -    Banana.

Procedimiento

Homogeneización.
Colocar una porción del material biológico en un mortero, agregar arena y machacar hasta disgregar los tejidos.

Detección de colesterol.
Colocamos el material homogeneizado en un vaso de precipitados, le agregamos 10 ml de la mezcla cloroformo – metanol (2:1), mezclamos enérgicamente con una varilla de vidrio durante 5 minutos para ayudarnos a obtener una mejor extracción.
Filtramos el homogenato obtenido por un papel de filtro y el filtrado lo recogemos en un tubo de ensayos.

Si la extracción fue correcta, los lípidos disueltos en la fase orgánica tendrán color amarillo, en caso de presentarse una fase acuosa turbia, esperar a que haya una buena resolución de las fases.
Tomamos 0.5 ml de la fase orgánica (inferior) y se deja caer en un tubo que contiene 2 ml de reactivo de Lieberman, agitamos y observamos el color que toma luego de 3 minutos.

Resultados

Detección de colesterol.
Sabremos si la muestra contiene colesterol, ya que esta cambiara su color con menor o mayor intensidad en caso de tenerlo (verde oscuro mayor abundancia de colesterol, mientras que será verde claro en caso de menor abundancia de colesterol).

Referencias:
En caso de ser positivo: +
En caso de ser negativo: -

Cuestionario:

1. ¿Por qué, en la extracción de lípidos, realizada en la práctica, se utiliza cloroformo-metanol?
2. ¿Qué detecta con el reactivo de Lieberman?
3. Se tiene dos muestras, una de origen animal y otra vegetal, pero sin rotular. Se practica el ensayo de Lieberman y la muestra 1 da negativa, mientras que la 2 da positiva. ¿Puede presumir el origen de cada una?
4. Se cuenta con 3 muestras homogeneizadas: A) Hígado: B) Pan; c) Batata.

A las 3 se les realizó identificación de lípidos, ADN y almidón, con los siguientes resultados:

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