La microbiología estudia

INTRODUCCION

La microbiología estudia, como su nombre lo indica, los microorganismos, es decir, aquellos organismos demasiado pequeños para poder ser observados a simple vista. Para llevar a cabo sus estudios la microbiología actualmente usa varios métodos, entre estos esta el de las tinciones, usadas comúnmente en el laboratorio.

La tinción diferencial requiere de más de un tipo de colorante y se utiliza para distinguir entre varios tipos de células bacterianas. Una tinción diferencial típicamente consiste de tres pasos principales: primero un colorante primario, el cual se utiliza para teñir a todas las células en la tinción; enseguida un paso de decoloración, el cual remueve el colorante solo de ciertos tipos de células y finalmente un colorante de contraste, el cual tiñe las células recién decoloradas pero no tiene efecto sobre las células que aún retienen el colorante primario.

La tinción propuesta por el medico danés Cristian Gram, en 1884 es una de las tinciones diferenciales mas utilizadas que clasifican los cultivos bacterianos en Gram positivas y Gram negativas.

En este informe daremos a conocer los resultados analizados en el laboratorio de microbiología describiendo lo que pudimos observar macro métricamente en los cultivos analizados, así como micrométricamente en las bacterias encontradas en ellos.

OBJETIVOS

1. Analizar macroscópicamente la morfología de las bacterias en el cultivo trabajado.

2. Clasificar algunas especies bacterianas encontradas en los cultivos analizados en Gram positivas o Gram negativas de acuerdo a la tinción de Gram.

3. Comprender la importancia que tienen estas tinciones para la caracterización e identificación de las bacterias.

MORFOLOGIA MACROSCOPICA

Características de la colonia aislada y pura:

A. Forma y crecimiento de las bacterias.

Puntiforme

. . .

. .

Circular

Filamentosa

Irregular

Fusiforme

B. Elevación de la colonia:

Plana

Elevada

Bajo Superficie

(Sumergida)

C. Características de los bordes:

Liso

Filamentoso

D. Consistencia de la colonia:

Seca.

E. Pigmentación:

Pigmentadas.

MATERIALES, EQUIPOS Y/O REACTIVOS

1. Microscopio óptico

2. Aceite de inmersión

3. Asas bacteriológicas curvas

4. Mechero de bunsen

5. Set de colorantes de Gram

6. Set de colorante de azul de metileno

MATERIAL PRESENTADO POR EL ALUMNO

1. Laminas y laminillas

2. Portaobjetos

3. Medio de cultivo (Caja de Petri)

4. Equipo de limpieza y desinfección (toallas, algodón, alcohol, hipoclorito de sodio y jabón)

5. Equipo de protección individual (tapabocas, cofia, guantes, bata de laboratorio, zapato cerrado.)

METODO

TINCION DIFERENCIAL

TECNICA DE GRAM

Paso 1: Tinción del frotis

Previamente fijado al color

Con cristal violeta (1 minuto)

Todas las células se tiñen de color azul-purpura.

Paso 2: Añadir Lugol

Dejar actuar 2 minutos.

Paso 3: Decoloración alcohol-cetona

Las células Gram (+) siguen de color azul-violeta.

Las células Gram (-) se decoloran

Paso 4: Tinción de contraste

Con safranina 2 minutos

Las células Gram (+) se ven azul-violeta.

Las células Gran (-) se ven rosas o rojas.

MORFOLOGÍA MICROSCOPICA

Constituida por forma, tipo de agrupación, tamaño y estructura.

1. cocos; 2.diplococo; 3. Cocos en cadenas; 4. Cocos en racimos; 5. Cocos entetradas; 6. Cocobacilos; 7. Bacilos; 8. Bacilos bordes redondeados; 9.bacilos bordes rectos; 10. Bacilos fusiformes; 11, 12. Bacilos curvos;

PROCEDIMIENTO:

La tinción de Gram es un tipo de tinción empleado en microbiología para la visualización de las bacterias, debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram que desarrolló un método de tinción en 1884.

Por más de una centuria las bacterias han sido clasificadas a la reacción de Gram, la habilidad de retener un complejo de iodo violeta cuando se trata con un solvente orgánico tal como el alcohol o la acetona, las bacterias Gram positivas retienen la tintura y aparecen de color violeta, mientras que las Gram negativas no lo pueden retener y se tiñen de color rojo para ser vistas con el microscopio, como se muestra a continuación:

En la

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