Los hechos históricos

JM García

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1. Introducción histórica

En el siguiente cuadro se muestran algunos de los hechos históricos más

relevantes en el desarrollo de las técnicas y métodos de cultivo de tejidos

1885

Roux

Consiguió mantener durante días células de embrión de pollo en una solución salina

1907

Harrison

Utilizó técnicas de estudio

in vitro

para el estudio de fenómenos

in vivo

, y demostró el

crecimiento de fibras nerviosas en cultivo

1910

Burrows

Empleó plasma de pollo para nutrir los cultivos embrionarios de pollo

1913

Carrel

Demostró la posibilidad de mantener en cultivo células de embrión de pollo, en

condiciones de asepsia, durante un tiempo superior a la vida del animal

1916

Rous y Jones

Utilizaron por primera vez extractos enriquecidos en tripsina para disociar células de

los tejidos

1948

Sanford y cols.

Demuestran la formación de clones celulares

1952

Gey y cols.

Establecen la primera línea celular humana contínua, las células HeLa

Levi-Montalcini y cols.

Determinan que el factor de crecimiento nervioso (NGF) estimula el crecimiento de

axones en cultivo

1954

Abercrombie y cols.

Observan la inhibición de crecimiento por contacto en fibroblastos

1955

Eagle

Desarrolla medios definidos y describe factores de adhesión

1958

Temin y Rubin

Desarrollan un ensayo cuantitativo para la infección de células de pollo en cultivo por

el virus del sarcoma de Rous

1961

Hayflick y Moorehead

Describen la vida finita de las células humanas diploides

1962

Buonassisi

Publica los métodos para mantener células diferenciadas

1964

Littlefield

Introdice el medio HAT para el crecimiento selectivo de células híbridas, y desarrolla

las técnicas de fusión celular

Ham

Utiliza el primer medio definido libre de suero

1965

Harris y Watkins

Producen el primer heterocarion de células de mamífero por la fusión inducida por

virus de células humanas y de ratón

1968

Yaffe

Estudia la diferenciación de mioblastos normales

in vitro

1969

Augusti-Tocco y Sato

Establecen la primera línea celular estable de neuroblastoma, línea de celulas

diferenciada

1975

Köhler y Milstein

Establecen la primera línea celular productora de anticuerpos monoclonales

1976

Sato y cols.

Publican una serie de trabajos que demuestran las distintas necesidades de

hormonas y factores de crecimiento que precisan diferentes líneas celulares

1977

Wigler y Axel

Desarrollan un método eficiente para introducir una copia simple de genes de

mamífero en células en cultivo

1986

Martín y Evans

Aíslan y cultivan células madre embrionarias pluripotenciales del ratón

1998

Thomson y Gearhart

Aíslan células madre embrionarias humanas

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2. ¿Qué entendemos por cultivo de tejidos?

Podemos decir que es el conjunto de técnicas que nos permiten mantener

células

in vitro

con una gran aproximación a sus propiedades y funciones

in

vivo.

Dependiendo del grado de preservación de la estructura del tejido u órgano de

origen y del tiempo de su duración distinguimos diferentes tipos de cultivos: de

órganos, explantes, primarios, secundarios, etc.

El término “cultivo de tejidos” suele ser usado como un término genérico que

incluye el de cultivo de órganos y el de cultivo de células.

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2.1 Tipos de cultivos de tejidos

•

Cultivo de órganos

: En este tipo de cultivo la organización tridimensional

del órgano

in vivo

se mantiene, aunque sólo sea parcialmente, y mantiene

todas o algunas de las características histológicas del tejido original. El

órgano o porción del mismo se mantiene en un medio líquido del que extrae

los nutrientes y al que elimina los desechos metabólicos. Los diferentes

tipos de células se mantienen en su forma diferenciada y constituye una

buena réplica del órgano original. Pero, sin embargo, generalmente no

permite la propagación, ya que el crecimiento de células se produce

únicamente en la periferia. Normalmente este tipo de cultivo es difícil de

mantener durante un tiempo prolongado debido a las diferencias

potenciales de crecimiento de los distintos tipos celulares que constituyen el

órgano. La falta de propagación tiene como consecuencia que para repetir

el experimento se necesite nuevo material, por lo que se produce cierta

heterogeneidad de muestras.

•

Explantes primarios

: Constituidos por fragmentos pequeños de tejidos u

órganos que se adhieren a una superficie en la que generalmente crecen

las células más periféricas del explante. Un cultivo se denomina

cultivo

primario

cuando las células o tejidos procedentes de un ser vivo crecen sin

haber pasado previamente por una fase de crecimiento

in vitro

. Un cultivo

se denomina

cultivo secundario

cuando procede de una fase previa de

crecimiento

in vitro

.

•

Cultivo de células

: Este tipo de cultivo está formado por células dispersas

disgregadas de un tejido vivo, de un cultivo primario, o de una línea celular,

mediante distintos sistemas mecánicos, químicos o enzimáticos. Las células

crecen en suspensión o adheridas a una superficie. Generalmente son

cultivos que contienen un único tipo de célula y éstas suelen ser

homogéneas genéticamente. Es el tipo de cultivo más utilizado en la

actualidad debido a su capacidad de propagación, es decir de crecimiento

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