Método de extracción y separación de pigmentos fotosintéticos

Experimento #6

Fotosíntesis

Gabriela M. Castillo Martínez

846-14-1197

15  de abril de 2014

Dr. Carlos J. Rodríguez Sallabery

Objetivos

• Conocer el método de extracción y separación de pigmentos fotosintéticos
• Conocer los pigmentos fotosintéticos presentes en las plantas
• Conocer y aplicar el proceso de cromatografía de papel

Materiales

1. Mortero de Cerámica

1. 2.Tubo de ensayo grande
2. Tapón de Goma
3. Presilla
4. Gradilla de tubos de ensayo
5. Cronometro
6. Tijera
7. Regla
8. Gotero
9. Membrana de papel

Reactivos

• Acetona
• Petrolato de éter+acetona
• Hojas de diferentes plantas y coloración

Métodos

1. Buscamos en el complejo de la universidad una variedad de hojas y flores de distintos tamaños y colores.
2. Luego de la búsqueda, cortamos las diferentes hojas y flores en trozos pequeños y las maceramos un mortero de cerámica junto con un agregado de  acetona.
3. Ensamblamos el tubo de ensayo con la presilla y esta la adjuntamos al papel de filtro.
4. Utilizando un tubo capilar saturamos el extremo del papel de filtro con el extracto de las plantas.
5. Colocamos la tira del papel de filtro verticalmente con la muestra hacia abajo en el tubo de ensayo de manera que esta hiciera contacto con la mezcla de solventes extraídos de las plantas.
6. Esperamos unos instantes y observamos hasta que la separación se llevara a cabo y el solvente llegara a la parte superior del papel de filtro.
7. Retiramos el papel de filtro del tubo de ensayo y la dejamos secar para poder observar las bandas de los distintos colores de los respectivos pigmentos.

Resultados

No obtuvimos resultados satisfactorios con respecto a la separación de los pigmentos en la cromatografía en papel.

Discusión

La cromatografía en papel es un método de separación física, este permite identificar los componentes que se han de separar. Se distribuyen en dos fases una está en reposo conocida como la fase estacionaria mientras que la otra es conocida como la fase móvil que es la que se mueve en una dirección definida. Los pigmentos fotosintéticos son moléculas que absorben luz visible, son varios los tipos de pigmentos existentes pero algunos del más importante son: La clorofila a, clorofila b carotenoides y xantófilos. En este laboratorio utilizamos la cromatografía de papel como una estrategia para separar distintos pigmentos fotosintéticos. Los pigmentos fotosintéticos fueron obtenidos de unas plantas recolectadas en el complejo universitario. A estos le extrajimos   el extracto de hoja conocido como la muestra y saturamos en la parte posterior de la fase estacionaria con un tubo capilar. Dentro del ensamblaje colocamos lo que será la fase móvil, la cual es el solvente utilizado fue petrolato de éter más acetona. La hipótesis postulada fue la siguiente: El pigmento fotosintético menos polar será el que se desplazara más en el papel  de filtro. Como resultado según la investigación los resultados debían ser los siguientes de acuerdo a sus respectivas estructuras: El beta caroteno es el pigmento fotosintético más polar con 0 grupos por ende sería el más soluble y se desplazara más en el papel de filtro dando a un color naranja seguido por los xantofilos con 2 grupos polares y dando a un color amarillo, luego la clorofila a con 5 grupos polares dando a un color verde claro y finalizando con la clorofila b con 6 grupos polares dando a un color verde más oscuro. Debido a algún error desconocido no pudimos observar resultados satisfactorios con respecto a la separación de los pigmentos en la cromatografía en papel.

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