Objetivos De PCR Y Electroforesis

Objetivos

• PCR

 Generales:

• Amplificar la muestra de ADN previamente extraído por medio de la Reacción en Cadena de Polimerasa (PCR).

 Específicos:

• Valorar las aplicaciones de esta técnica en la Medicina, mediante la comprensión sus fases, métodos y materiales.

• Realizar la replicación del material genético mediante el conocimiento apropiado del proceso de Amplificación.

• Reconocer el procedimiento empleado para preparar el Mix de trabajo y el uso del equipo de laboratorio (Termociclador, Cámara de Flujo Laminar).

• Comprender cuál es la razón por la que se usan diferentes temperaturas y ciclos para realizar este procedimiento, además de saber diferenciar los reactivos usados en el Mix de trabajo.

Preguntas iniciales:

-Explique que es la clonación acelular de ADN y cuál es la técnica de laboratorio que nos permite realizar este procedimiento.

La clonación acelular se refiere a un procedimiento por el cual se logra que los ácidos nucleídos tanto ADN como ARN se repliquen, sin la necesidad de de usar una célula para lograr el objetivo. Se producen copias de un gen o una parte de ADN la cual se la somete a un proceso conocido como "Amplificación", llamado también Reacción en Cadena de Polimerasa (PCR sus siglas en Ingles).

-Cuál es la utilidad del PCR en la práctica clínica?

La gama de utilidad de este procedimiento es bastante alta, y más en cuanto a su aplicación clínica. Principalmente su aplicación comienza en el rastreo de mutaciones para prevenir enfermedades, tanto parentales como adquiridas. Se usa principalmente para detectar secuencias de ADN que se conoce, para buscar alteraciones en ellas. Finalmente podríamos decir que la aplicación mas grande de este proceso es la detección de células tumorales, incluso antes de que el cáncer se genere, por lo que permite

-Cuales son las ventajas y desventajas del PCR?

Ventajas:

-Tiene una gran sensibilidad y especificidad.

-Es una técnica con la cual se puede detectar la presencia de ADN viral.

-Especifica el tipo viral, y a qué grupo pertenece, facilitando su tratamiento.

-Cuenta con controles internos que aseguran que no se reporten resultados falsos negativos.

Desventajas:

-Proceso dependiente de cambio de temperaturas en tiempos exactos, lo que puede producir errores al momento de programar el termociclador.

-Es un método ya no tan usado actualmente, fue reemplazado por el uso de la secuenciación

-Se necesitan primers específicos que sean complementarios a la cadena que se desea buscar.

-Riesgo de contaminación de la muestra.

o Electroforesis

 Generales:

• Lograr separar las distintas especies químicas de la muestra (ADN o proteínas) de acuerdo a su peso molecular, carga eléctrica y su tamaño, usando la técnica de Electroforesis.

 Específicos:

• Reconocer la funcionalidad del uso del gel poroso en el proceso, y su elaboración.

• Valorar el uso del campo eléctrico aplicado en la muestra,

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