PRÁCTICA 9 y 10 “Reacciones enzimáticas de óxido-reducción (SDH y Citocromo oxidasa)”
Enviado por anDiie_Rg • 22 de Mayo de 2016 • Apuntes • 1.558 Palabras (7 Páginas) • 1.334 Visitas
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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
INGENIERÍA EN SISTEMAS AMBIENTALES
BIOQUÍMICA FUNDAMENTAL
4AV1
PRÁCTICA 9 y 10
“Reacciones enzimáticas de óxido-reducción (SDH y Citocromo oxidasa)”
Integrantes:
Castillo Alemán Nelson
Rosales Avendaño Víctor Manuel
Profesores:
Dr. Carlos Wong Baeza
Q.F.I Rocío del Carmen Guzmán Ibarra
M. en C. Pedro Antonio Loyola Abitia
Dra. Doris Neri Cortes
INTRODUCCIÓN
La deshidrogenasa succínica es una enzima que se localiza en eucariotes en la membrana mitocondrial interna, porque participa en dos procesos metabólicos a la vez, el ciclo de Krebs y la cadena de transporte electrónico. En el ciclo de Krebs, es una Oxidorreductasa que cataliza la oxidación del succinato para formar fumarato siendo la coenzima el FAD.
El 2,6-diclorofenolindofenol y el azul de metileno resultan ser indicadores redox apropiados para funcionar en los homogenizados de tejidos.
El H2 cedido por el succinato puede ser transferido del FADH2 a un colorante susceptible como el azul de metileno que al cambiar su estado redox pasa de coloreado a incoloro o viceversa Con este cambio del indicador redox se comprueba que la enzima está transformando el sustrato.
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El citocromo oxidasa es última enzima de la cadena de transporte de electrones respiratoria de las mitocondrias situado en la membrana mitocondrial. Se recibe un electrón de cada uno de cuatro moléculas de citocromo c, y los transfiere a una molécula de oxígeno, la conversión de oxígeno molecular a dos moléculas de agua, constituye lo que se conoce como complejo 4 de la cadena de transporte electrónico y está presente en todos los organismos aerobios (es decir que utilizan el oxígeno como aceptor de electrones). En el proceso, se une cuatro protones desde la fase acuosa interna para hacer que el agua, y además translocaliza cuatro protones a través de la membrana, ayudando a establecer una diferencia de protones transmembrana potencial electroquímico que la ATP sintasa usa entonces para sintetizar ATP.
OBJETIVO
Observar la actividad enzimática experimentalmente de la deshidrogenasa succinica ‘’SDH” y citocromo oxidasa mediante la reacción oxido-reducción.
RESULTADOS
Tabla 1Resultados de la actividad enzimática ‘’SDH’’
Tubo No. | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
Observación(color) 0 min | Azul Intenso | azul | azul | Azul verdoso | |||
Observación(color) 2 min | - | Azul Intenso | -- | --- | - | - | |
Observación(color) 4 min | -- | Azul Intenso | --- | ---- | - | -- | |
Observación(color) 6 min | -- | Azul Intenso | --- | ---- - | -- | --- | |
Observación(color) 8 min | -- | Azul Intenso | --- | ---- -- | - | -- | --- |
Observación(color) 10 min | -- | Azul Intenso | ---- | ---- -- | -- | -- | ---- |
Observación(color) 15 min | --- | Azul Intenso | ---- | ---- --- | --- | --- | ---- - |
Observación(color) 20 min | ---- ---- | Azul Intenso | ---- - | ---- ---- | --- | ---- - | ---- -- |
Observación(color) 49 min | ---- ---- - | Azul Intenso | ---- -- | ---- ---- - | ---- | Azul oscuro | turquesa |
Coloración que se observó en cada tubo, cada ( - ) indica disminución de color y en el caso del tubo 6 y 7 indica cómo se iba decolorando, hasta que hubo un cambio de color diferente al inicial.
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