PREPARACIÓN DE UN FROTIS BACTERIANO Y TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

PRÁCTICA No. 10

PREPARACIÓN DE UN FROTIS BACTERIANO Y TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN

OBJETIVOS

- Aplicar el mecanismo de la tinción de Ziehl Neelsen, con microorganismo conocidos y desconocidos.

- El alumno aplicará una técnica de coloración para la diferenciación de microorganismo acido alcohol resistente.

RESULTADOS

FORMA AGRUPACIÓN ZIEHL NEELSEN

(BAAR O NO BAAR) MICROORGANISMO

Esférica (Cocos) Staphylococcus No BAAR Staphylococcus saprophyticus

Bacilos cortos Diplobacilos NO BAAR E. coli

DISCUSIÓN

Primeramente se llevó a cabo la preparación de dos frotis una de Cocos y otra de Bacilos. Para esta práctica se utilizó fucsina básica como colorante primario, esta disolución se aplica con calentamiento a emisión de vapores, como agente decolorante se aplicó una mezcla etanol y ácido sulfúrico o ácido clorhídrico, y por último se aplicó el azul de metileno como colorante secundario.

Al calentar el colorante primario a emisión de vapores, se favoreció la disolución de los ácidos grasos y permitió el paso del colorante al interior de la célula. Al suspender el calentamiento y lavarlo con agua se provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante es impedido para salir de las bacterias, también aumento la energía cinética de las moléculas del colorante lo que permitió fácilmente su entrada a las bacterias. El complejo colorante – fenoles más soluble en los lípidos bacterianos que el agente decolorante, lo cual contribuyo su permanencia en la célula.

En la primera muestra de Staphylococcus saprophyticus se observaron la presencia de NO BAAR, que la bacteria es NO ÁCIDO ALCOHOL RESITENTE, mientras que el E. coli se observaron que los bacilos eran BAAR que las bacterias eran ACIDO ALCOHOL RESISTENTE. Y en la última imagen de Mycobacterium tuberculosis se observó la presencia de BAAR que era ÁCIDO ALCOHOL RESISTENTE,

CONCLUSIÓN

En la práctica se logró aplicar el mecanismo de la tinción de Ziehl Neelsen, con microorganismos, también se logró la técnica de coloración para diferenciar microorganismos acido alcohol resistentes.

El proceso de decoloración es muy energético, cualquier bacteria que no contenga abundante lípido como Mycobacterium y Nocardia perderá fácilmente el colorante primario y se fijara entonces el azul de metileno.

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