PRÁCTICA LABORATORIO Tema: Actividad enzimática
Enviado por camilo59 • 16 de Marzo de 2019 • Documentos de Investigación • 1.673 Palabras (7 Páginas) • 828 Visitas
PRÁCTICA LABORATORIO
Tema: Actividad enzimática.
Objetivos
- Identificar como actúa la enzima catalasa manipulando la cantidad de sustrato.
- Medir la expulsión de gas total después de que la reacción finalice.
Variables
- Cantidad de sustrato manipulado para los tres intentos
- Tiempo
- Reacción de la catalasa
Fundamento teórico
Enzimas
Las enzimas son proteínas globulares que actúan como biocatalizadores, cuya función es acelerar la velocidad de las reacciones químicas que se producen en el organismo y que son necesarias para mantener su actividad biológica, lo cual realizan al disminuir la energía de activación. Un catalizador es una sustancia que disminuye la energía de activación de una reacción química. Al disminuir la energía de activación, se incrementa la velocidad de la reacción. Las reacciones catalizadas por enzimas ocurren en velocidades a veces más rápidas que las no catalizadas. (Scribd.2017)[pic 1][pic 2]
Catalasa
La catalasa es una enzima antioxidante común que es producida naturalmente en casi todos los organismos vivos. Las reacciones en la catálisis son importantes para la vida; ayudan a descomponer el peróxido de hidrogeno-un agente oxidante poderoso y dañino-en oxígeno y agua, previniendo la acumulación de burbujas de dióxido de carbono en la sangre.
La catalasa es una enzima muy potente: una molécula de catalasa puede descomponer millones de moléculas de peróxido de hidrogeno en oxígeno y agua. También usa el peróxido de hidrogeno para oxidar las toxinas potencialmente dañinas del cuerpo, como el formaldehido, el ácido fórmico, alcohol y fenol. (Scribd.2017)
Metodología
En este trabajo se intenta reflejar como la cantidad de sustrato es un factor que acelera la actividad enzimática de la catalasa y tener en cuenta que a mayor cantidad de sustrato mayor cantidad de oxigeno es liberado. Teniendo en cuenta que la catalasa se encuentra en la célula de los tejidos animales donde la función de esta es necesaria en el metabolismo celular ya que durante dicho proceso se forma una molécula toxica que es el peróxido de hidrogeno(H2O2), la catalasa se encarga de descomponerlo en agua y en oxígeno, y esta es la forma en que soluciona el problema.
En esta practica se intenta recrear ese medio en el que, durante el metabolismo celular de algunos alimentos (hígado de pollo) debido a que este tiene una gran cantidad de antioxidantes los cuales se forman por el peróxido de hidrogeno (H2O2).
Se harán 3 intentos por cada medida (5ml-10ml-15ml).
Materiales
- Soporte universal
- Pinza nuez
- 1 Erlenmeyer con desprendimiento lateral
- 2 probetas
- Vidrio reloj
- Balanza electrónica
- Pipeta graduada
- Pipeteador
- Tapón
- Manguera
- Peróxido de hidrogeno
- Hígado de pollo
- Recipiente hondo
¿Cómo hacer el montaje? (Figura 1.) (figura 1.1)
Introducir la manguera al desprendimiento lateral del Erlenmeyer.
Sujetar la pinza nuez al soporte universal.
Aparte llenar el recipiente un poco mas de la mitad y la probeta completamente con agua. Girar la probeta 180° sin derramar agua de lo contrario aparecerán burbujas y afectara la medición del gas, haciendo que la abertura quede dentro del recipiente sumergida unos pocos centímetros, y fijarla con la pinza nuez.
El extremo libre de la manguera introducirlo en la probeta. Así queda por terminado el montaje y listo para ser utilizado.
Figura1. Figura 1.1
[pic 3][pic 4]
Procedimiento
- En el Erlenmeyer de desprendimiento lateral se debe introducir un trozo de hígado de pollo (0.6 g).
- Verter el peróxido de hidrogeno (5 ml-10ml-15ml) en el Erlenmeyer y posteriormente ponerle el tapón e inmediatamente activar el cronometro con secuencias de 1 minuto por cada intento.
- Observar la reacción y al completarse el minuto retirar la manguera de la probeta. Posteriormente medir el desplazamiento del agua que se encontraba en la probeta y este valor será la cantidad de O2 producto de la reacción.
- Repetir el proceso tres veces por cada volumen de H2O2, en cada repetición lavar el Erlenmeyer para eliminar residuos de peróxido de hidrogeno ya que este puede reaccionar con la nueva muestra de hígado y afectar los resultados.
Ejemplo de la reacción: figura 1.3
[pic 5]
[pic 6]
Tabulación de resultados [pic 7][pic 8][pic 9][pic 10][pic 11][pic 12]
Cantidad de sustrato (ml) | Desplazamiento de oxigeno (ml) |
5 | 55 |
5 | 27 |
5 | 19 |
5 | 15 |
10 | 26 |
10 | 24 |
10 | 25 |
15 | 7 |
15 | 32 |
15 | 32 |
15 | 33 |
[pic 13]
*NOTA: Recordar el peso del hígado (0.6 g).
Cada intento dura 1 minuto.
Análisis y limitaciones
- Numero de intentos: para cualquier practica que arroje resultados se recomienda un mínimo de 3 intentos, ya que por medio de estos podemos observar la diferencia y sacar promedio de los datos.
Al observar la tabla (grafica 1) identificamos que en el primer y tercer intento hay un ensayo de más, hicimos esto debido a que sus resultados arrojaron valores fuera del rango esperado.
- Promedio de datos:
5 ml | 29 ml |
10 ml | 25 ml |
15 ml | 26 ml |
[pic 14][pic 15]
[pic 16]
cantidad de sustrato | promedio (datos cercanos) |
5 ml | 20,33 ml |
10 ml | 25 ml |
15 ml | 32,33 ml |
[pic 17]
- ¿Por qué se da la reacción de la catalasa?
El peróxido de hidrógeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos, pero tiene gran potencial de toxicidad.
La Catalasa es una enzima presente en muchos tipos de células. Su función es proteger a las células del efecto tóxico del peróxido de hidrógeno (agua oxigenada).
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