Proceso para obtener un transgénico de pimiento resistente a nematodos (Meloidogyne spp)

Universidad Central del Ecuador[pic 1][pic 2]

Facultad de Ciencias Agrícolas

Carrera de Ingeniería Agronómica

Genética Vegetal

Tema: Proceso para obtener un transgénico de pimiento resistente a nematodos (Meloidogyne spp)

Nombre: Oscar Benjamín Ipiales Hidalgo                                        Curso: Cuarto “B”

Introducción

Los nematodos del género Meloidogyne son responsables de grandes pérdidas en cultivos de importancia económica. Entre las especies más importantes económicamente se encuentran Meloidogyne incognita, M. javanica y M. arenaria. M. incognita habita en climas tropicales y es posiblemente el parásito más dañino de los cultivos en el mundo Los nematodos causan una pérdida del 20 % en el cultivo de pimiento (Capsicum annuum, L.) (Trudgill y Blok, 2001).

Procedimiento

La selección de mi gen se ubica en Solanum L. pimpinellifoHum, L. peruvianum y L. glandulosum. Este gen tiene la función de dar resistencia a la planta de tomate silvestre contra nematodos (Meloidogyne spp), el gen se codifica con el nombre de GEN MI-1. El gen MI-1 contiene 300 kb situado cerca del centrómero del cromosoma 6. La secuencia en la que se encuentra determinado gen MI-1 hace que utilicemos la enzima de restricción Taq I la cual nos ayudara a la separación del ADN (Jablonska, 2007).

Ya con mi segmento de ADN es necesario realizar una clonación la cual será posible en bacterias ya que tienen ADN de una sola cadena. Las bacterias que nos ayudan a la clonación están Escherichia coli, Pseudomonas o Bacillus de diferentes especies. Luego de la recombinación de ADN bacteriano con mi gen MI-1. Luego de inserción primaria del ADN, obtenida del plásmido pTiT37 derivado de la bacteria Escherichia coli , incluye una copia sencilla del gen MI-1, la cual con el promotor E35S, la secuencia que codifica el péptido de trascripción al cloroplasto y la proteína de resistencia hacia los nematodos incluyendo los codones de inicio y terminación de traducción, codificando los 450 aminoácidos que dan   lugar la síntesis en su totalidad de la proteína que da resistencia, cuya presencia en las células de pimiento ya se confirma mediante pruebas de ELISA y otras más (Padgette et al., 1993).

Los genes que se insertan en la células de pimiento posteriormente formara células trasformadas las que se las aislaran para cultivo de células las cuales generaran  nuevas plantas de pimiento  ya resistentes a nematodos la cual pasara por un proceso de estudio de nueva característica, ya que este estudio se lo realiza para ver si no había cambio en el la planta en algún aspecto morfológico.

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Bibliografía

Jablonska B. Ammiraju J , Bhattarai K, Mantelin S, Martinez O, Philip A., and Kaloshian I. (2007). The Mi-9 Gene from Solanum arcanum Conferring Heat-Stable Resistance to Root-Knot Nematodes Is a Homolog of Mi-1. Plant Physiology, 143, 1044–1054.

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