Reaccion De La Catalasa

Introducción:

La catalasa es una enzima perteneciente a la categoría de las oxidorreductasas que cataliza la descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua. Esta enzima utiliza como cofactor al grupo hemo y al manganeso.

2 H2O2 2 H2O + O22

El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos y tiene entre otras una función protectora contra microorganismos patógenos, principalmente anaerobios, pero dada su toxicidad debe transformarse rápidamente en compuestos menos peligrosos. Esta función la efectúa esta enzima que cataliza su descomposición en agua y oxígeno. Además la catalasa se usa en la industria textil para la eliminación del peróxido de hidrógeno, así como en menor medida se emplea en la limpieza de lentes de contacto que se han esterilizado en una solución de peróxido de hidrógeno.

El mecanismo completo de la catalasa no se conoce, aun así la reacción química se produce en dos etapas:

H2O2 + Fe (III)-E → H2O + O=Fe (IV)-E

H2O2 + O=Fe (IV)-E → H2O + Fe (III)-E + O2

Objetivo: En esta sesión de laboratorio se determinará cualitativamente la actividad enzimática de la catalasa.

Materiales y Reactivos:

1 gradilla.

1 vaso de precipitados de 500 mL.

1 pipeta de 5 mL.

5 tubos de ensaye de 15 x 150 mm.

1 pinza para tubo de ensaye.

1 mechero, tripié y tela de asbesto.

Peróxido de hidrógeno al 3%

Cianuro de sodio al 5%

Nitrato de plomo al 5%

Solución de sangre diluida 1:50

Métodos:

1) Prepare un baño de agua hirviendo utilizando su vaso de precipitados de 500 mL.

2) Coloque en su gradilla cuatro tubos de ensaye y numérelos para su identificación.

3) Adicione peróxido de hidrógeno al 3% a cada uno de los cuatro tubos.

4) Agregue cinco gotas de cianuro de sodio al 5% al tubo 3.

5) Agregue cinco gotas de nitrato de plomo al 5% al tubo 4.

6) En un tubo de ensaye aparte, coloque 3 mL de sangre diluida 1:50 y caliéntela en el baño de agua hirviendo por cinco minutos. Agregue el contenido al tubo 2.

7) Añada 3.0 mL de sangre diluida a los tubos 1, 3 y 4.

8) Utilice el baño de agua del laboratorio a temperatura controlada.

9) Suave, pero rápidamente, agite los tubos y llévelos al baño de agua a 37°C. La reacción de la catalasa es sumamente rápida, así que no hay que perder de vista ni un momento los tubos, sobre todo el número 1 donde está la reacción normal sin inhibir.

10) Deje todos los tubos en el baño de agua a 37°C por cinco minutos.

11) Haga sus observaciones y anote sus resultados.

Resultados y Discusión:

Inmediatamente después de llevar los diferentes tubos al baño de agua a 37°C se logró observar un

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