“SIEMBRA EN PLACA SOBRE MEDIOS DIFERENCIALES”

“SIEMBRA EN PLACA SOBRE MEDIOS DIFERENCIALES”

Alejandra Llamuca

Laboratorio de Microbiología de Alimentos II[pic 1][pic 2]

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÌA EN ALIMENTOS (FCIAL)

UNIVERSIDAD TÈCNICA DE AMBATO (UTA)

RESUMEN

En la práctica de siembra en placa sobre medios diferenciales se inició con la preparación del agar leche, seguido de las diluciones cada vez menores e inoculando por el medio de difusión en placa esto se realizó con dos agares (McConkey y Leche)  y se incubo a 37ºC por 24 horas y ahí se observó con las diferentes presencias de colonias, por lo que se concluyó que la presencia de coágulos debido a que se desnaturalizo la proteína de la leche y el halo transparente en donde presento la hidrolisis de la caseína. Además se obtuvo en las diluciones de 10-3 con 1,28 x 106 ufc en el Agar McConkey y en el Agar Leche en la dilución 10-4 con 1,41 x 106 las demás diluciones fueron incontables.

INTRODUCCIÓN

El método de siembra a emplear dependerá de los objetivos que se pretendan alcanzar con el cultivo, ya que en ocasiones se requiere que el desarrollo del microorganismo se produzca de forma masiva, mientras que en otras resulta indispensables que las colonias queden aisladas o que las manifestaciones del metabolismo tengan lugar con tensiones reducidas o privadas de oxígeno. (Salazar, 2011)

La población microbiana existente en nuestro entorno es grande y compleja. Cientos de especies microbianas habitan normalmente en distintas partes de nuestro cuerpo, incluidas la boca, el tracto intestinal y la piel. Al nacer, los microbios inmediatamente empiezan a colonizar nuestros cuerpos, así como a casi todos los objetos del mundo. Un estudio adecuado de microorganismos que hay en estos hábitats requiere técnicas que permitan conocer y ordenar la compleja población mixta o cultivo mixto, separándole en sus distintas especies como cultivos puros. Un cultivo puro consta de una población de células derivadas todas ellas de una célula parental. Los microorganismos se cultivan en el laboratorio sobre materiales nutritivos denominados medios. Se dispone de una gran cantidad de medios y la clase que se debe de utilizar depende de muchos factores, uno de los cuales es la clase de microorganismos que se va a cultivar. El material que se inocula sobre el medio se denomina inóculo mediante alguna. Durante la incubación a 37ºC, las células microbianas individuales se reproducen tan rápidamente que en un lapso de 18 a 24 horas producen masas visibles de células denominadas colonias. Una colonia es visible a simple vista. Cada colonia  diferente es presumiblemente un cultivo puro de una sola clase de microorganismo.  (Herrera, 2008)

Un medio diferencial consiste en un medio de cultivo que es capaz de distinguir dos microorganismos por su crecimiento diferencial en el mismo, usando las propiedades metabólicas de ambos en presencia de un determinado nutriente y de un indicador que evidencia un pH ácido en su entorno. (Duran, 2010)

El objetivo de la práctica fue aprender los medios diferenciales con la siembra de placa, además se cultivó bacterias lácticas con muestra de leche y así identificar si se hidroliza la caseína.

MATERIALES Y MÉTODOS

Para realizar la práctica de siembra en placas sobre medios diferenciales, se empezó con preparación de la receta prescrita de agar leche (2.5g de Extracto de Levadura, 5 g de Peptona, 1 g de Glucosa, 20 g de Leche en polvo, 15 g de Agar, 1000ml de Agua), luego se realizó diluciones seriadas de la muestra de leche, desde 100 hasta 10-4, se inoculó por el método de difusión en placa en los dos Agares (McConkey y Leche)  y se incubó en el flujo laminar(C4, Colombia) a 37°C por 24 horas.

CALCULOS Y RESULTADOS

N= número de colonias                                 

FD= factor de dilución        

Vi= volumen inoculado                        

[pic 3]

                        [pic 4]

                                                         [pic 5][pic 6]

Tabla N°1. “Número de colonias y ufc/ml de la muestra en agar de McConkey ”.

Elaborado por: Llamuca, A; (2014)                                              Fuente: Laboratorio de Microbiología I; FCIAL

Tabla N°2. “Número de colonias y ufc/ml de la muestra en agar de leche”.

Elaborado por: Llamuca, A; (2014)                                              Fuente: Laboratorio de Microbiología I; FCIAL

Graficas

[pic 16]              [pic 17]

En la Fig. 1: Se observa la presencia de coágulos debido a que se desnaturalizo la proteína de la leche y el halo transparente en donde presento la hidrolisis de la caseína.

...