Se coloca una mezcla de los compuestos 1 al 6 formando una mancha a 2.0cm a la derecha y 2.0 cm por encima del borde inferior izquierdo de una placa para cromatogafía de capa fina.

Problema 1

Se coloca una mezcla de los compuestos 1 al 6 formando una mancha a 2.0cm a la derecha y 2.0 cm  por encima del borde inferior izquierdo de una placa para cromatogafía  de capa fina. Se permite que el Cromatograma se desarrolle en el disolvente A, hasta que el frente del disolvente llega a una distancia de 12.0cm del borde inferior de la placa. Después de esta operación se observan 2 manchas, una a 4.5 cm y la otra a 10cm del borde inferior del placa. Tras dejar secar la placa se gira 90° en sentido contrario a las manecillas del reloj y se corre el Cromatograma en el disolvente B hasta que el frente del disolvente se encuentre a 12cm del borde  sumergido de la placa. La primer mancha de izquierda a derecha se separa en 4 manchas: a 2.7,5.1,6.5 y 9.9 cm del borde inferior; la segunda manca se separó en dos, a los 4.7 y 10.6 m del borde inferior, Dibuje la apariencia de la placa (a escala aproximada) después de la primera etapa y después de la segunda etapa de la separación, y calcule los valores de Rf de cada mach en cada etapa.

[pic 1][pic 2][pic 3][pic 4][pic 5]

[pic 6][pic 7][pic 8][pic 9][pic 10][pic 11]

[pic 12]

[pic 13]

[pic 14]

        [pic 15][pic 16]

[pic 17]

Primer macha sus cuatro manchas:

1)Rf=2.7/12=.225

2)Rf=5.1/12=.425

3)Rf=6.5/12=.541

4)Rf=9.9/12=.825

Segunda mancha con dos manchas:

1)Rf=4.7/12=.391

2)Rf=10,6/12=.883

Problema 2.

Una mezcla de dos compuestos (A y B) migra desde el origen, generando dos manchas con las siguientes características (distancia de migración desde el origen x y diámetro de la mancha w).

 xA = 49 mm  wA = 2.0 mm

xB = 33 mm wB = 2.5 mm

El frente de la fase móvil fue de 61 mm, desde el inicio. Calcule los valores de Rf para los compuestos A y B.

[pic 18]

Problema 3.

Una mezcla de dos compuestos (A y B) migra desde el origen, generando dos manchas con las siguientes características (distancia de migración x y diámetro de la mancha w).  

xA = 27 mm  wA = 2.0 mm

xB = 33 mm  wB = 2.5 mm

El frente de la fase móvil fue de 60 mm, desde el inicio.

a) Calcule el factor de retardo Rf, la eficiencia N, y la altura equivalente de un plato teórico HETP para cada compuesto.

b) Calcule la resolución entre los compuestos A y B

c) Establezca la relación entre el factor de selectividad y el Rf de los dos compuestos. Calcule su valor numérico

a)

[pic 19]

[pic 20]

[pic 21]

[pic 22]

b) [pic 23]

Problema 4.

La siguiente figura representa los resultados de una placa de CCF en fase normal (fase móvil: hexano: acetona, 80:20). Los compuestos tienen las estructuras A, B, y C.

[pic 24]

1. Indique en el registro, a cuales picos corresponden los compuestos A, B, y C.

        El primer pico a la izquierda corresponde al compuesto “C”, el segundo a “B” y el de         la derecha es “A”

1.  ¿Cuál debería ser el orden de elución de estos compuestos si se examinaran por columna de HPLC utilizando los mismos tipos de fases móvil y estacionaria?  El orden de elución seria: “A”, “B”, “C”.
2. ¿Cuál debería ser el orden de elución de estos compuestos si se examinaran por columna de HPLC conteniendo una fase de tipo RP-18, con una mezcla binaria de acetonitrilo: metanol (80:20) como eluente?  El orden de elución debería ser: “C”, “B”, “A”.
3. Calcule Rf y HETP para el compuesto que migra más rápidamente sobre la placa

             [pic 25][pic 26]

  Problema 5. Para conocer la presencia de trimetoprima y sulfametoxazol en diferentes productos farmacéuticos se emplea la técnica de capa fina. Se utiliza una Cromatoplaca de sílica gel con indicador. Como fase móvil Mezcla de cloroformometanol- hidróxido de amonio. Después de realizar el tratamiento adecuado a las muestras y estándares e identificarlos como:

[pic 27]

se aplicó a la placa de gel de sílice cromatográfica, 10 µl de las soluciones A y B de la preparación de referencia y 10 µl de la preparación de la muestra. Se dejó correr la fase móvil hasta 12 cm arriba de la línea de aplicación. Al retirar la cromatoplaca de la cámara, se marcó el frente de la fase móvil, se secó con aire seco, localizando las bandas por observación bajo luz ultravioleta de onda corta, rociando con la solución reveladora y obtuvimos lo siguiente:

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