Tinción De Gram

La tinción de Gram La técnica de la tinción de Gram fue desarrollada por el bacteriólogo danés Christian Gram en 1884. Esta tinción clasifica las bacterias en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas (Figura 3.9). La técnica incluye tinción primaria, decoloración y tinción de contraste:

1.Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta, que tiñe de violeta.

2.Se añade el mordiente, iodo.

3.Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución de acetona o etanol. En este momento, las bacterias Gram negativas pierden su tinción violeta, pero las Gram positivas retienen el colorante.

4. Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de rosa las bacterias Gram negativas, previamente decoloradas; mientras que a las bacterias Gram positivas les proporciona un color violeta más intenso.

Figura 3.9 Tinción de Gram. La tinción de Gram divide a las bacterias en dos grupos, Gram positivas y Gram negativas. La microfotografía muestra una preparación teñida por la técnica de Gram y que contiene células de Staphylococcus aureus y de Escherichia coli. Esta última es una bacteria Gram negativa, porque sus células han perdido el color violeta durante la decoloración y se han teñido de rosa con el colorante de contraste.

El distinto comportamiento frente a los colorantes de las bacterias Gram positivas y Gram negativas se debe a las diferencias existentes en sus superficies externas. Las células Gram negativas poseen una capa de peptidoglicano delgada y una membrana ex-terna. Las bacterias Gram positivas poseen una capa gruesa de peptidoglicano v carecen de membrana externa. Esta importante diferencia se describe más adelante en el Capítulo 4.

La tinción de Cram es extraordinariamente útil en clínica. Esta técnica es, casi siempre, la primera prueba que se lleva a cabo en la identificación de un microorganismo causante de una enfermedad, aislado de un paciente. Con sólo un microscopio y unos cuantos botes de colorante podemos averiguar si un organismo es Gram positivo o Gram negativo, su morfología celular y su agrupación típica. Esto, a veces, es suficiente para determinar con qué tipo de bacteria estamos trabajando. Es más, el tratamiento de una inFección depende de que el agente sea Gram positivo o Gram negativo, ya que algunos antibióticos actúan Sólo sobre los primeros, y otros sobre los segundos. La penicilina, por ejemplo, es más efectiva contra bacterias Gram positivas; mientras que la estreptomicina v la tetraciclina actúan sobre ambas.

...