Un Protocolo desinfeccion

Protocolo de desinfeccion en cultivos vegetales para explantes ( Tejido vivo separado de su órgano propio y transferido a un medio artificial de crecimiento, tejido in vitro) de segmentos nodales.

Protocolo de desinfeccion

1) Protocolo Lavado

Lavar los segmentos nodales con agua destilada y estil con 3 repeticiones, la primera y la segunda agua destilada con agua destilada estéril y la tercera con agua destilada estéril y ácido ascórbico una concentración de 0,05g/100mls

2) Protocolo desinfección

Lavar los segmentos nodales con hipoclorito de sodio en concentración de 1,0% durante un minuto, lavar en agua destilada estéril 3 veces, luego en hipoclorito de sodio en concentración de 2,5 % durante 1 minuto, lavar en agua destilada estéril 3 veces, después poner los explantes en etanol al 70% durante 20 segundo, lavar en agua destilada estéril con ácido ascórbico a una concentración de 0,05g/100mls por 3 veces, posteriormente se lava el explante en tween, 1 gota, lavar en agua destilada estéril 3 veces, lavar en tween, 3 gotas, seguidamente se realizan tres enjuagues con agua destilada estéril, para ser inoculados en los recipientes que contienen el medio de cultivo.

3) Protocolo medio de establecimiento

Agua destilada estéril, sacarosa al 3%,Composición del medio de cultivo de Murashige y Skoog MS, vitaminas: Tiamina, niacina, pyridoxina, ácido ascórbico, ácido pantotenico (en un rango de concentración de 90 mg.L-1) , Aminoácidos: glutamina, asparagina, cisteína, caseína, glutamina, adenina, triptófano; Reguladores de crecimiento: Auxinas: 2,4,D ; IAA ; IP3, Compuestos orgánicos: (Agua de coco y agua de extracto de papa) ; Reguladores de crecimiento: Poliamida, silicatos, phytagel 0,3%; PH: 5,8.

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