Аctividad de PKA

Nuestros resultados demuestran claramente que la regulación espacial de la actividad de PKA es una faceta críticamente importante de la migración y la invasión y, por lo tanto, quizás la metástasis - de las células EOC. borde de las células migratorias, con las descripciones más detalladas en fibroblastos y células de carcinoma de mama y colon.Nuestros datos ahora extienden este paradigma a las células EOC y expanden el paradigma de una manera importante y sustantiva demostrando la localización de PKA en el borde de ataque durante la invasión de matriz tridimensional. Además, también hemos demostrado el requisito de la función AKAP para la migración de células EOC, como se ha demostrado para otros tipos de células.

Finalmente, también hemos demostrado por primera vez  el requisito de anclaje de PKA a través de AKAPs para la invasión de células cancerosas de un ECM tridimensional. Tal vez lo más probable es que, durante la migración, hay una actividad significativa de PKA dentro del citosol que no es detectada por la membrana-atado pmAKAR3 y no como se concentra como actividad dentro del borde de ataque.Así, mientras que los complejos RIIAKAP regulan preferentemente los eventos dentro del borde de ataque, los complejos RI-AKAP pueden presidir innumerables eventos dentro del resto de la célula - fuera del borde de ataque - que también contribuyen en última instancia a la migración/invasión. Más razonablemente, sin embargo, uno podría comenzar a abordar empíricamente la materia a través de imágenes más frecuentes y una correlación más estrecha de la morfología celular y la actividad de PKA durante toda la duración de la migración y la invasión, y la observación posterior de cambios discretos en estos parámetros en ausencia de anclaje de tipo I o de tipo II.

Si bien hemos demostrado claramente que tanto la función PKA como la función AKAP son necesarias para la migración e invasión de células EOC, los objetivos moleculares discretos para la PKA, así como el AKAP específico responsable de la localización de PKA en estas células son desconocidos. La delimitación de vías de señalización específicas que vinculan la PKA con la migración y la invasión se ve dificultada por el número considerable y creciente de sustratos de PKA asociados al citoesqueleto y/o a la migración  y proteínas de anclaje . Es se complica aún más por el hecho de que, como se ha señalado anteriormente, la inhibición de los bloques de anclaje de tipo I o de tipo II de PKA provoca la migración y la invasión, probablemente a través de diferentes efectores. Además, aunque no es el foco del estudio actual, cabe señalar que, como una quinasa regulada por cAMP intracelular, PKA es muy probable que trabajar en concierto con los otros efectores principales cAMP, los epacs , que pueden formar multi-andamios componentes con PKA para mediar eventos de señalización en respuesta a cAMP  y también tienen una influencia considerable sobre la adherencia celular, migración y eventos relacionados .

A pesar de esta posibilidad, el estudio actual establece inequívocamente un papel para la propia PKA, en un paradigma que implica su localización a través de AKAPs, en la regulación no obstante, el estudio actual establece inequívocamente un papel para la propia PKA, en un paradigma que implica su localización a través de AKAPs, en la regulación de la migración del cáncer de ovario y la invasión de la matriz. Si bien nuestros datos demuestran la necesidad de la actividad de PKA y el anclaje durante la migración, así como la invasión, no se sabe si los objetivos de PKA durante la migración serán los mismos que los de la invasión. Aunque los procesos están íntimamente relacionados, la migración puede ocurrir sin invasión, pero la invasión no puede ocurrir sin migración, y el mecanismo exacto de migración durante la invasión puede diferir en función del fenotipo celular y las señales microenvironmental . Dada nuestra creciente apreciación de las diferencias entre la migración celular en dos dimensiones frente a tres dimensiones  y las diferencias entre la migración celular normal y tumoral, no sería sorprendente si fuera distinta conjuntos de sustratos de PKA y proteínas de anclaje fueron llamados para regular específicamente los procesos involucrados en la invasión celular de la CIO en comparación con la migración.

Un ejemplo intrigante sería un requisito para la PKA localizada en la regulación de la expresión, secreción o función de proteínas específicas de la invasión como las metaloproteasas de matriz . Sin embargo, la identificación de los sustratos y proteínas de anclaje para la PKA que son relevantes para la migración y la invasión son un foco continuo para varios laboratorios, incluyendo el nuestro. La diseminación metastásica de la COE, al igual que otros cánceres, depende completamente de la capacidad adquirida de las células tumorales para sufrir migración celular invasiva . En este trabajo, hemos demostrado que tanto las células EOC migratorias como las invasoras exhiben PKA enriquecido dentro de su borde de ataque y que tanto la actividad PKA como su localización a través de AKAPs son necesarias para la migración y la invasión de células EOC.

Esta es la primera demostración de una asociación de actividad de PKA localizada y el proceso de invasión de la matriz. Para ser cierto, el modo in vitro de invasión matricial evaluado en el presente estudio no recapitula el curso completo y los mecanismos asociados de la metástasis de EOC in vivo. Especialmente relevantes en este sentido son la biología compleja tanto de la interacción de las células EOC metastásicas con su microambiente objetivo, que consta de células mesoteliales y fibroblastos, además de componentes ECM, y de esferoides tumorales multicelulares, considerada la unidad metastásica mínima de CIO.

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