Actividad Enzimatica
Enviado por dahia8 • 9 de Diciembre de 2013 • 262 Palabras (2 Páginas) • 430 Visitas
Determinación de la actividad enzimática.
Se tomo 2.5 ml de una solución de almidón de 1% p/v y se la adiciono en un tubo de ensayo; luego se tempero por 3 minutos a 90°C; después de este lapso de tiempo se agrego 0.5 ml de la enzima diluida al tubos y se llevo nuevamente por a 90°C por 20 minutos. Al pasar los 20 minutos para la reacción se agregó 0.5ml
de NaOH al tubo. Por último se realizo el protocolo de DNS para la determinación de azucares reductores.
Al comparar la intensidad entre los tubos se observó que la intensidad del color amarillo es fuerte en nuestro caso que trabajamos con la solución de 1% y en los demás disoluciones se aprecia que la intensidad del color amarillo disminuye en el siguiente orden de (0.8, 0.6, 0.4, 0.2, 0.1).
Evaluación Cualitativa de la presencia de almidón.
Al tomar 0.5ml de cada solución preparada y agregarle 30 μL de lugol a cada uno. Se puede observar que las soluciones no presentan coloración a diferencia de la solución de control la cual con yodo forma el complejo de almidón por lo cual toma una coloración morada oscuro.
Determinación del % porcentaje de azúcares reductores utilizando DNS.
Se realizo las disoluciones de la muestra con agua destilada; se tomo 1 ml y se adiciono 1ml de reactivo DNS. Después de poner los tubos en baño a ebullición por 5 minutos, y posteriormente pasar los tubos aun baño de hielo por 5 minutos. La monitora leyó las absorbancias de todas las soluciones a 540nm. Los lecturas
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