Coliformes en placa

                        UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE HIDALGO[pic 1][pic 2]

INSTITUTO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

Practica 6

Coliformes en medio solido

Catedrático  Doctora Ma. Roció López Cuellar

Elaborado por Rivera Moreno Alfredo Joshue

                     Grupo: 1                      semestre: 4                     turno: vespertino

INTRODUCCION

Los organismos Coliformes constituyen un grupo heterogéneo, con hábitat primordialmente intestinal, que involucra; una variedad de bacterias muy abundantes en la materia fecal del hombre.

Este grupo incluyen bacilos Gram negativos, no esporuladas, fermentadores de lactosa, aeróbicos o anaeróbicos facultativos, en forma de varilla. Producen colonias negras con brillo metálico en agar tipo endo.

El uso de los organismos Coliformes como indicador sanitario significativo, debe restringirse a; bebidas, al agua y hielo potables, a los alimentos sometidos a procesos térmicos y a la evaluación de la eficiencia de prácticas sanitarias.

El artículo (Camacho, 2009) nos dice que debido a que un gran número de enfermedades son transmitidas por vía fecal-oral utilizando como vehículo los alimentos y el agua, es necesario contar con microorganismos que funcione como indicador de contaminación fecal. Estos deben de ser constantes, abundantes y exclusivos de la materia fecal, deben tener una sobrevivencia similar a la de los patógenos intestinales y debe de ser capaces de desarrollarse extra intestinalmente. El grupo coliforme es constante, abundante y casi exclusivo de la materia fecal, sin embargo, las características de sobrevivencia y la capacidad para multiplicarse fuera del intestino también se observan en aguas potables, por lo que el grupo coliformes se utiliza como indicador de contaminación fecal en agua; conforme mayor sea el número de coliformes en agua, mayor será la probabilidad de estar frente a una contaminación reciente. Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no sólo sobreviven, sino que se multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere un significado distinto al que recibe en el agua. En productos alimenticios que han recibido un tratamiento térmico (pasteurización, horneado, cocción, etc.), se utilizan como indicadores de malas prácticas sanitarias. Los microorganismos coliformes constituyen un grupo heterogéneo con hábitat primordialmente intestinal para la mayoría de las especies que involucra. El grupo de bacterias coliformes totales comprende todos los bacilos Gramnegativos aerobios o anaerobios facultativos, no esporuladas, que fermentan la lactosa con producción de gas en un lapso máximo de 48 h. a 35°C ± 1ºC. Este grupo está conformado por 4 géneros principalmente: Enterobacter, Escherichia, Citrobacter y Klebsiella.

El grupo de coliformes fecales, está constituido por bacterias Gram-negativas capaces de fermentar la lactosa con producción de gas a las 48 h. de incubación a 44.5 ± 0.1°C. Este grupo no incluye una especie determinada, sin embargo la más prominente es Escherichia coli. La demostración y el recuento de organismos coliformes, puede realizarse mediante el empleo de medios de cultivo líquidos y sólidos con características selectivas y diferenciales.

En el artículo ((Bautista L.)señala que la venta de alimentos en la calle constituye un factor positivo por su posibilidad de generar empleos y movilizar recurso  y satisfacer la obtención de comisad rápidas entre otras ventajas. Sin embargo la frecuente presentación de malas condiciones higiénicas en el procesamiento y oferta señala  la importancia de mantener el control sanitario a esta actividad. Sin embargo son susceptibles a ser detectados con microorganismos patógenos como coliformes.

 (D. A. A. Mossel) señala los principios de investigaciones ecológicas que han puesto de manifiestos a que E. coli  procede del intestino del hombre y de los animales de sangra caliente, si bien puede sobrevivir y multiplicarse en determinados sustratos. Del origen fecal de E. coli se concluye que si esta bacteria se encuentra en un alimento indica que a tenido lugar una contaminación de origen fecal y que, existe el riesgo de que hayan llegado al alimento en cuestión microorganismos patógenos de procedencia entérica. E. coli es el marcador sanitario ideal en el análisis microbiológico de los alimentos crudos o que no han sido sometidos a ningún tratamiento para asegurar su inocuidad, por ejemplo estos microorganismos se encuentran en alimentos como verduras, hortalizas, moluscos, etc., que pueden inferirse que han tenido lugar una contaminación de origen fecal.

Objetivo

identificar las características de microorganismos coliformes totales en medio solido y conocer la importancia de la presencia de coliformes en una muestra como un grupo indicador de calidad.

Desarrollo de la actividad practica

Preparación de Agar bilis rojo violeta.[pic 3]

• Suspender 41.5 g del polvo en un litro de agua destilada.
• Mezclar perfectamente,
• calentar con agitación frecuente
• hervir por un minuto hasta disolución completa.
• Enfriar a 42-44 º C aproximadamente y usar de inmediato.

Preparación agua peptonada [pic 4]

• Solver 20g. en un litro de agua destilada.}
• Dispensar en los volúmenes deseados.
• Esterilizar en autoclave a 121° durante 15 minutos

PROCEDIMIENTO.

• 1.- Realizar diluciones decimales de 10 -1 a 10 -3.
• 2.- Transferir 1 mL de cada dilución a cajas petri estériles.
• 3.- Agregar de 12 a 15 mL de medio agar bilis rojo violeta mantenido a 45-48 ºC.
• 4.- Mezclar correctamente el medio con la muestra. Dejar solidificar sobre una superficie plana y horizontal.
• 5.- Agregar aproximadamente 4 mL del mismo medio extendiéndolo para cubrir completamente la superficie.
• 6.- Dejar solidificar.
• 7.- Incubar las cajas en posición invertida a 35 ± 2 º C durante 24 ± 2 horas.
• 8.- Contar el número de colonias en cada caja y multiplicar por la inversa de la dilución.

Resultados

Tabla 1.1 resultados de los conteos y características observadas en el análisis a la Lechuga desinfectada 1

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