Extracción De Muestra Sanguinea

MANEJO DE MUESTRAS SANGUINEAS:

Segun la prueba a realizar extraera un mayor o menor volumen de sangre en un tipo u otro de recipiente, entre ellos cabe destacar:

Porta objetos de cristal bien desengrasado: Suelen utilizarse para recogida de sangre capilar.

Toma de sangre sobre capilares de vidrio, hay de dos tipos:

Heparinizados: para la determinación del hematocrito y gasometria en neonatos. (color rojo)

No heparinizados: Para la dterminación del tiempo de coagulación (azul)

Toma sobre recipientes de plastico esteriles: Con anticoagulante incorporado en sus paredes, se recogen en ellos muestras para determinaciones como recuentos, formula leucocitaria, VSG, hemoglobina, etc.

Toma sobre recipientes de vidrio esteriles, con o sin anticoagulante incorporado. Suelen utilizarse para las pruebas anteriores, además de las pruebas de coagulación que los requieran.

ANTICOAGULANTES:

Cuando se requiere sangre total o plasma, se utilizan anticoagulantes químicos que permiten el estudio de sus componentes, ya que evita la coagulación sanguínea que haria imposible la manipulación técnica de la muestra.

TIPOS DE ANTICOAGULANTES MÁS UTILIZADOS EN ANALISIS CLINICOS:

Oxalato

Citrato

Fluoruro

Edta

Heparina: Es el anti coagulante presente en bajas concentraciones en la sangre humana normal.

Forma de utilización: Se encuentra en el comercio en forma de sa sódica, potásica o de litio. También se puede utilizar en forma de sal de amonio.

Mecanismos de acción: Inhibe la acción de protrombina a trombina, la transformación de fribrinogeno en fibrina por acción de la trombina y es un factoe estabilizador plaquetario( evita su aglutinación).

Concentraciones o dosis: lo más conveniente es utilizar 75 U de heparina por ml de sangre ( aproximadamente 0.75 mg/ml)

d) Preparación:

1º Se disuelven 300mg de heparinato de amonio en 20 ml de agua destilada.

2º En cada tubo se introduce el equivalente a 50 ul de solución por ml de sangre.

3º Se deseca a Tª de 90-100º C, cuando más alta es la temperatura de secado menor es la solubilidad del producto remanente.

Precauciones, ventajas e inconvenientes:

Su precio es relativamente alto.

A razon de 0,1-0,2 mg/ml de sangre no afecta al volumen corpuscular.

Es el mejor anticoagulante para prevenir la hemolisis y para las pruebas de fragilidad osmótica.

No resulta satisfactorio su uso para el recuento de leucocitos o para la preparación de extensiones de sangre, pues en este segundo caso produce un fondo azul en las preparaciones teñidas con colorante de Wright.

Aplicaciones:

Hematocrito

Pruebas de fragilidad osmótica.

ERRORES DE MANIPULACIÓN DE MUESTRAS CON ANTICOAGULANTE:

Al utilizar cualquier anticoagulante hay que tener en cuenta:

Las extensiones de sangre deben prepararse inmediatamente.

Si en el plazo de 2-3 horas no van a llevarse a cabo otras determinaciones, la sangre debe refrigerarse a 4º C.

Si la sangre se mantiene a Tª ambiente, es probable que entre 6- 24 horas se hinchen los eritrocitos elevándose el hematocrito y el VCM, disminuyendo la CHCM y la VSG.

Durante 24 horas no se modifican: recuentos, hemoglobina, hematocrito y los indices eritrocitarios, si la sangre se ha mantenido incoagulada en EDTA y se ha almacenado a 4º C

Homogenizar bien la sangre con anticoagulante.

MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS:

CONSERVACIÓN: En algunas ocasiones es necesario conservar las muestras durante un tiempo prolongado antes de su análisis para ello es importante que el TEL conozca:

Factores que influyen en la conservación de de una muestra:

Temperatura: como norma general para la conservación de muestras en el laboratorio, se emplean las siguientes temperaturas:

Temperatura ambiente (18-30º C)

Temperatura de nevera (4ºC)

Temperatura de congelación (-5º C)

Generalmente cuando más baja es la temperatura, mayor es la estabilidad ( se inhiben los procesos encimáticos que alteran la muestra, asi como el posible crecimiento microbiano)

pH: Ciertos componentes de la sangre son mucho más estables cuando aumenta o disminuye el pH.

Preservativos químicos: existen dos grupos.

Los que evitan transformaciones bioquímicas de la muestra ente ellos está el Fna.

Los que intentan evitar la proliferación microbiana, entre ello está el timol, antibióticos, etc.

Conservación de la sangre entera:

La sangre entera puede ser conservada para un análisis hasta 4 horas sin tratamiento alguno. Tanto a 20º C como a 4º C

Como norma general siempre que se pueda realizar cualquier análisis de sangre antes de las 4 horas de su recogida.

No debe conservarse largos periodos ni siquiera a 4º C.

Se desaconseja totalmente pretender conservarla a temperatura ambiente.

No existe ninguna sustancia química que añadida a la sangre entera, impida la producción de modificaciones de importancia diagnóstica significatica.

No debe ser congelada.

Conservación de plasma y suero:

A temperatura ambiente no cabe esperar modificación alguna de los metabolitos y enzimas durante las primeras 6 horas.

A 4ºC y en recipiente cerrado, plasma y suero pueden ser conservados hasta 24 horas sin que presenten modificaciones.

Si deben conservarse por más tiempo es necesario congelarlos o liofilizarlos.

TRANSPORTE DE MUESTRAS SANGUINEAS:

Se tendrá en cuenta los siguientes puntos:

hay que evitar confusiones, tener perfectamente rotulados los tubos antes, durante y después del transporte.

Asegurarse que los tubos estan perfectamente cerrados antes de transportarlos.

Transportarlos cuidadosamente, pues, movimientos bruscos, vibratorios, etc. Podrían provocar hemólisis.

No transportarlos en recipientes que tengan altas o bajas temperaturas o que contengan algun foco próximo, frio o caliente.

OBTENCIÓN DE DISTINTOS TIPOS DE MUESTRAS:

Sangre entera: Mezclaremos la sangre extraida

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